来源：期刊VIP网 时间：
作者：秦合伟;王梦楠;李彦杰;孙孟艳;高洋;刘丹丹;
单位：河南省中医院;河南中医药大学;
摘要：目的 探讨血管软化丸能否通过调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路抑制细胞焦亡改善载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E knockout, APOE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)。方法 10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组，60只APOE~(-/-)小鼠随机分为模型组、血管软化丸低剂量组、血管软化丸高剂量组、阿托伐他汀组、血管软化丸高剂量和AMPK抑制剂联合组、AMPK抑制剂组，给予高脂饮食饲养18周建造动脉粥样硬化小鼠模型，并于第13周给予不同方法干预，干预6周后取材，分别检测各组小鼠甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-eholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein-eholesterol, HDL-C)水平，HE和油红O染色观察小鼠主动脉组织病理形态学变化，Elisa测定主动脉组织白细胞介素(interleukin, IL)-1β和IL-18水平，Western Blot检测AMPK、P-AMPK、NLRP3、裂解的半胱氨酸天冬酶1(Cleaved-Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)-N蛋白表达，免疫荧光检测P-AMPK、NLRP3蛋白在主动脉根部的分布情况，透射电子显微镜观察主动脉内皮超微结构改变情况。结果 与对照组相比，模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著升高，HDL-C水平显著降低(P<0.01),主动脉根部细胞排列紊乱，且脂肪空泡明显，主动脉有明显粥样斑块沉积，P-AMPK蛋白表达水平显著降低，NLRP3、Cleaved-Caspase 1、GSDMD-N蛋白表达水平及IL-1β和IL-18水平显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较，血管软化丸高低剂量组及阿托伐他汀组血脂紊乱得到改善，主动脉组织及细胞病变程度减轻，P-AMPK蛋白表达水平显著升高，NLRP3、Cleaved-Caspase 1、GSDMD-N蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-1β和IL-18水平显著降低(P<0.05或P<0.01);与血管软化丸高剂量+AMPK抑制剂组比较，血管软化丸高剂量组焦亡相关蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01),主动脉内皮细胞损伤程度减轻，而AMPK抑制剂组与之相反。结论 血管软化丸可能通过调控AMPK/NLRP3通路减轻细胞焦亡发挥对动脉粥样硬化小鼠的保护作用。
关键词：血管软化丸;动脉粥样硬化;AMPK/NLRP3信号通路;细胞焦亡
基金资助：国家自然科学基金面上项目(82374551); 河南省高等学校重点科研项目(24B360003); 中原英才计划中原青年拔尖人才项目(豫组通[2021]44号); 河南省中医药拔尖人才培养项目专项(2022ZYBJ15)
