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作者：陈治彤;张伟;蔡建涛;吕岳芹;刘泓屹;曹伟军;顾有方;郑海学;杨帆;
单位：安徽科技学院动物科学学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室;甘肃省病原生物学基础学科研究中心;
摘要：本研究旨在初步探究细胞铁硫蛋白2(CISD2)对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响。运用CRISPR/Cas9基因编辑方法成功构建CISD2基因敲除的猪肾细胞系（PK-15），通过测序与Western-blot鉴定CISD2基因的敲除，采用间接免疫荧光试验、Western-blot、RT-qPCR等方法比较FMDV在CISD2基因敲除细胞系和野生型细胞中的复制差异，统计分析CISD2对FMDV复制的影响。结果显示，测序及Western-blot证实CISD2基因敲除单克隆细胞系构建成功，间接免疫荧光试验、Western-blot、RT-qPCR等方法均显示FMDV在CISD2基因敲除细胞中的复制水平显著高于野生型细胞。本研究成功利用CRISPR/Cas9系统构建了CISD2基因敲除细胞系，并发现在该细胞中能显著促进口蹄疫病毒复制。上述结果为进一步探究CISD2的功能及其在调控FMDV等病毒感染机制方面提供了材料和数据支撑。
关键词：口蹄疫病毒;;CRISPR/Cas9;;CISD2基因;;细胞系
基金资助：国家自然科学基金项目(32072831,32102639);; 国家重点研发计划项目(2021YFD1800300);; 甘肃省杰出青年基金项目(21JR7RA026);; 兰州大学中央高校基本科研业务费专项(lzujbky-2022-ey20);; 甘肃省科技重大专项计划项目(22ZD6NA001)
