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作者：张子博;陈运通;范文瑞;吴龙波;李雨萌;郭茹;张艳萍;刘长军;祁小乐;刘永振;王素艳;崔红玉;段雨路;李留安;高玉龙;
单位：天津农学院动物科学与动物医学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽免疫抑制病创新团队;
摘要：为研制禽类肝炎-心包积液综合征（HHS）重组马立克病病毒（MDV）活载体疫苗，通过PCR扩增血清4型禽腺病毒（FAdV-4）强毒株Fiber2基因并克隆入pcDNA3.1载体，构建重组真核表达质粒pSV40-Fiber2，然后通过PCR扩增和同源重组构建表达黏粒pMS-Fiber2，与其他4个相互重叠并覆盖MDV全基因组的黏粒共同转染至鸡胚成纤维细胞（CEF）拯救病毒rMDV-Fiber2，在CEF中传代后用PCR、间接免疫荧光试验和Western-blot进行鉴定，并绘制体外生长曲线，分析其体外复制特性。结果表明，rMDV-Fiber2能够稳定表达Fiber2蛋白，rMDV-Fiber2在CEF中的复制能力与亲本病毒rMSΔmeq无明显差异；攻毒保护试验结果表明，重组病毒rMDV-Fiber2免疫后鸡能够对FAdV-4强毒株感染有80%存活率。结论，构建成功的重组病毒rMDV-Fiber2与亲本株的复制力相似，为研制HHS重组MDV活载体疫苗奠定了基础。
关键词：血清4型禽腺病毒;;重组马立克病病毒活载体疫苗;;Fiber2
基金资助：国家自然科学基金项目(U21A20260);; 国家肉鸡产业技术体系项目(CARS-41)
