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作者：刘紫威;甘卫泽;尹欣悦;徐明国;顾晓晓;李红欢;王文星;马忠臣;陈创夫;
单位：石河子大学动物科技学院;绵羊健康养殖与人兽共患病防控协同创新中心;昌吉州动物疾病预防控制中心;伊犁州动物疾病控制与诊断中心;
摘要：制备猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行株PEDV GⅡb型的S1蛋白亚单位疫苗并评价其免疫效果。将PEDV S1基因克隆至pET-30a（+）载体中，转化至大肠杆菌中表达，用Western-blot分析蛋白表达情况。将蛋白与Quil-A佐剂混合免疫小鼠，设置三联苗、PBS对照，评价蛋白免疫效果。PCR及测序结果显示：重组质粒构建成功。Western-blot结果表明：重组质粒在蛋白水平上正确表达。特异性IgG抗体水平检测结果显示：该亚单位疫苗能诱导强烈的体液免疫应答，蛋白组诱导Th2型免疫应答。首次免疫后第28和42天蛋白组小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ水平显著高于疫苗对照组和PBS组（第28天：P<0.01；第42天：P<0.05），而疫苗组与PBS组无显著性差异，这说明蛋白免疫后能够显著性诱导小鼠机体产生细胞免疫应答。小鼠血清中中和抗体水平检测结果显示：S1蛋白免疫组血清中和抗体效价最高且显著高于疫苗组。综上，通过大肠杆菌系统表达的PEDV S1蛋白具有良好的免疫原性和抗原特异性，因此该重组蛋白具有成为猪流行性腹泻疫苗候选物的潜力。
关键词：GⅡb型猪流行性腹泻病毒;;IgG抗体水平;;中和抗体水平
基金资助：河北省重点研发计划项目(21322912D);; 石河子大学高层次人才科研启动项目(RCZK202456)
