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作者：于文博;迟田英;郑辉;李博文;吴发兴;崔进;代飞燕;
单位：云南农业大学动物医学院;中国动物卫生与流行病学中心;
摘要：利用牛轮状病毒(BRV)阳性血清（中和效价1∶256）为一抗，FITC标记的山羊抗牛Ig G为二抗，建立了一种检测牛轮状病毒的间接免疫荧光试验方法，并对其工作浓度和孵育时间进行优化，获得了最佳条件。采用该方法对48份临床疑似牛轮状病毒样本进行检测，并与RT-PCR、病毒分离这2种病原学检测结果进行比较。结果显示，一抗1∶300稀释、孵育120 min，二抗1∶500稀释、孵育120 min为最佳工作条件；对BCoV、IBRV、BVDV、BRSV、BPIV3无交叉反应；病毒滴度为10~(1.25)TCID_(50)/0.1 mL时仍有特异性绿色荧光，且不同时刻在相同条件试验时，荧光强度不受影响；临床样本检测结果显示，IFA方法相对于病毒分离方法具有更高的敏感性，与RT-PCR检测结果的符合率为100%。表明，建立的间接免疫荧光方法具有较好的特异性、敏感性、重复性和准确性，可用于临床牛轮状病毒感染的检测。
关键词：牛;;轮状病毒;;间接免疫荧光法
基金资助：云南省高原畜禽消化道营养与健康创新团队项目(202305AS350024);; 云南省个旧市牛产业科技特派团项目(202304BI090007);; 石林县农民院士科技服务站项目(A3012024017)
