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作者：刘仲元;南栩;谭书桢;秦峰;董虎;张韵;郭慧琛;孙世琪;徐业芬;
单位：西藏农牧学院动物科学学院农业农村部西藏包虫病防治重点实验室西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：为优化口蹄疫纳米抗体M170和M8蛋白的制备工艺，通过构建原核及真核重组表达质粒，分别在大肠杆菌或悬浮HEK293细胞中表达上述2种重组抗体蛋白，并对其纯度、产量以及亲和力进行比较分析。结果表明，原核表达系统制备M170和M8重组蛋白的产量是真核表达系统的2.5～3倍，生产周期可缩短至2 d内，适合进行规模化生产；真核表达系统制备M170和M8重组蛋白至少需要7 d、且产量较低；蛋白活性鉴定结果表明，两种表达系统制备的M170和M8构象无显著差异，都能特异性识别口蹄疫病毒146S抗原或12S抗原。本研究为后期口蹄疫病毒型抗原定量ELISA试剂盒的生产工艺优化提供了参考。
关键词：口蹄疫病毒;;146S抗原;;纳米抗体
基金资助：甘肃省自然科学基金项目(24JRRA012);; 国家自然科学基金青年基金项目(32301127);; 2023兰州市人才创业创新项目(2023-RC-3)
