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作者：郭伟;刘瑞鹏;张佳甜;尉嘉锡;郭慧琛;孙世琪;马全英;滕志东;王晓强;
单位：兰州交通大学生物与制药工程学院;兰州交通大学化学化工学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：为提升表达A型口蹄疫病毒（FMDV）结构蛋白大肠杆菌的稳定性，以大肠杆菌活性为评价指标，在单因素试验基础上采用Box-Behnken响应面法优化冻干保护剂组合。利用Box-Behnken结果进行回归模型拟合，得到最佳冻干保护剂配方为3.192%（质量分数，下同）山梨醇、3.094%谷氨酸钠、6.924%乳糖、3%脱脂奶粉和5%海藻糖，并对配方进行了验证。为分析真空冷冻干燥菌种的稳定性，将冻干及未冻干的菌种置于25℃和37℃放置不同时间，重溶后测定大肠杆菌的活性和表达蛋白的水平，结果显示，在25℃和37℃条件下，冻干样品相比于未冻干样品显示出更好的活性，表明冷冻干燥可以提高表达A型FMDV结构蛋白大肠杆菌的储存时长和稳定性。本研究为提升原核表达系统的稳定性和储存期提供了新方案。
关键词：口蹄疫病毒;;大肠杆菌;;真空冷冻干燥;;Box-Benhnken响应面法
基金资助：中国博士后科学基金项目(2023M733819);; 国家成都农业科技中心地方财政专项(NASC2024KR06);; 兰州市人才创业创新项目(2023-RC-3)
