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作者：黄华;孙薛亮;季利江;马俊杰;魏巍;郭天威;
单位：南京中医药大学常熟附属医院肛肠科;南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科;南京中医药大学中医学院;南京中医药大学常熟附属医院脾胃病科;南京中医药大学常熟附属医院病理科;
摘要：目的 探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎(UC)小鼠的影响。方法 采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证，再予3%DSS诱导建立UC模型，将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组(20 g/kg)、美沙拉嗪组(200 mg/kg),每组6只，灌胃给予相应药物。观察小鼠体质量、粪便情况、疾病活动指数，HE染色观察小鼠结肠组织病理学比较，ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平，采用试剂盒检测小鼠结肠组织铁负荷、GSH、MDA水平，RT-qPCR和Western blot法检测小鼠结肠组织GPX4、FTH1、ACSL4 mRNA和蛋白表达。利用TNF-α诱导NCM460结肠细胞炎症，加入柔肝健脾方含药血清和铁死亡诱导剂RSL3处理细胞，CCK-8法检测细胞存活率，ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6水平，分析细胞中铁负荷、GSH、MDA水平，以及GPX4、FTH1、ACSL4 mRNA和蛋白表达。结果 与模型组比较，柔肝健脾方组小鼠体质量增加(P<0.01),结肠长度延长(P<0.01),疾病活动指数、组织病理学评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平、结肠组织MDA水平、铁水平、ACSL4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),GSH水平、GPX4、FTH1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。在NCM460细胞中，柔肝健脾方可抑制TNF-α诱导的细胞上清IL-1β、IL-6水平及铁死亡水平(P<0.01)。结论 柔肝健脾方可有效改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症以及TNF-α诱导的结肠细胞炎症，其作用机制与调控细胞铁死亡有关。
关键词：柔肝健脾方;;溃疡性结肠炎;;氧化应激;;铁死亡
基金资助：江苏省中医药科技发展计划项目(MS2021007,MS2023099);; 苏州市科技局医疗卫生科技创新项目(SKJY2021131);苏州市科技局“科教兴卫”青年科技项目(KJXW2023069);; 常熟市科技局医学应用基础研究项目(CY202340);; 常熟市卫生青年骨干人才“全国导师制”项目(2023);; 南京中医药大学自然科学基金(XZR2023076)
