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作者：成伟伟;容维中;杨明;李元新;赵子惠;陈伯祥;王佳;周瑶;
单位：甘肃省畜牧兽医研究所;
摘要：为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响，试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因，并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a（+），且诱导表达了IL-6蛋白。将构建的GM-CSF基因的重组载体、诱导表达的IL-6重组蛋白联合畜禽疫病防控技术研发课题组前期构建的TGEV DNA疫苗载体p-N-His分组免疫小鼠（设置p-N-His为对照），运用间接ELISA检测了特异性抗体水平。将构建的重组载体、诱导表达的重组蛋白和PBS分组免疫小鼠，测定了小鼠的生长性能、血清指标和免疫器官指数。结果显示，克隆的GM-CSF和IL-6基因大小分别为579 bp和576 bp，成功构建了真核表达载体p-GM-CSF和原表达载体p ET-IL-6，诱导表达的IL-6重组蛋白大小为38 ku。载体p-GM-CSF、IL-6蛋白联合p-N-His免疫小鼠后，p-N-His+p-GM-CSF、p-N-His+IL-6蛋白和p-N-His均刺激机体产生了特异性抗体，且p-N-His+IL-6蛋白抗体水平高于p-N-His+p-GM-CSF(P<0.05)。IL-6蛋白、p-GM-CSF和PBS分组免疫小鼠后，p-GM-CSF和IL-6蛋白组小鼠的生长性能指标均高于PBS组，且末重、平均日增重、料重比差异显著（P<0.05）。p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的生化指标总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的含量差异均不显著（P>0.05），但IL-6蛋白组小鼠的葡萄糖显著升高（P<0.05）,p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的免疫器官指数差异均不显著（P>0.05）。文章以p-N-His为靶载体验证出GM-CSF和IL-6具有较强免疫佐剂活性，且IL-6蛋白的效果强于GM-CSF。p-GM-CSF和IL-6蛋白能够提升小鼠的生长性能指标，对血液指标和免疫器官指数影响不大。
关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子;;白细胞介素6;;免疫佐剂活性;;生长性能;;血液指标
基金资助：甘肃省自然科学基金实验动物专项[23JRRL0003];; 甘肃省青年科技基金计划项目[21JR7RA719];; 甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目[GNSW-2011-24];; 甘肃省重点研发计划项目[18YF1NA021-1]
