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作者：张曦元;孙千荟;孙丹丹;侯卓成;
单位：中国农业大学动物科学技术学院;
摘要：圆盘大MAGUK支架蛋白5(Discs Large MAGUK Scaffold Protein 5,DLG5)参与上皮细胞极性维持、肌肉发育和癌症发展等生理过程，但在禽类中的研究尚未深入。本研究旨在鉴定北京鸭DLG5基因的核心启动子区域并探究其多态性对于转录活性的影响，为探究该基因的功能和表达调控机制提供依据。构建含北京鸭DLG5基因启动子区缺失序列的双荧光素酶缺失载体，开展双荧光素酶报告试验，鉴定其核心启动子区域；获取北京鸭DLG5基因核心启动子区域的单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism,SNP）位点信息，构建双荧光素酶突变载体，开展双荧光素酶报告试验，探究其多态性对转录活性的影响；使用生物信息学方法分析北京鸭DLG5基因启动子区的序列特征和转录因子结合位点。结果表明，北京鸭DLG5基因的-1 298～-868 bp区域为负调控区域，-868～-431 bp和-431～-191 bp区域为正调控区域，-868～+124 bp区域是核心启动子区域。此外，-448 bp G>C突变可显著增强启动子活性（P<0.05）,-365 bp C>G突变可显著降低启动子活性（P<0.05）。生物信息学分析表明，北京鸭DLG5基因的核心启动子区域内有多个转录因子结合位点，包括TEAD4、MyoD、MyoG、C/EBPalpha、C/EBPbeta、AP-1、NF-1、SP1、ZBTB42、KLF15、KLF5等。此外，-448 bp G>C突变可能导致C/EBPbeta转录因子结合位点丢失，并生成NF-1转录因子结合位点，-365 bp C>G突变可能导致MyoG转录因子结合位点丢失，并生成SP1和Msx-1转录因子结合位点。系统进化树分析表明，北京鸭DLG5基因与鸿雁DLG5基因亲缘关系最近。本研究鉴定了北京鸭DLG5基因的核心启动子区域，并探究了其多态性对转录活性的影响，为后续探究该基因的功能和表达调控机制提供了理论依据。
关键词：DLG5;;启动子;;SNP;;转录因子;;北京鸭
基金资助：国家现代水禽产业技术体系（CARS-41）
