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作者:李瑞阳;何信逢;嵇桃桃;付开斌;陈家靖;陈祥;
单位:贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室;贵州大学动物科学学院;
摘要:为进一步探究沉默信息调节因子3(Sirtuin 3,SIRT3)基因对山羊繁殖性能的影响,本试验以黔北麻羊为研究对象,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测SIRT3基因在不同月龄睾丸组织的表达水平。通过构建SIRT3过表达真核表达载体pEGFP-N3-SIRT3并提取质粒转染至黔北麻羊睾丸间质细胞,以空载体pEGFP-N3为对照,使用qRT-PCR技术检测过表达SIRT3对细胞凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-Associated X Protein,BAX)、半胱天冬酶-3(Cysteine-aspartic Acid Protease-3,CASP3)、氧化应激相关基因过氧化氢酶(Catalase,CAT)、激素分泌相关基因细胞色素P450家族11亚家族A成员1(Cytochrome P450 Family 11 Subfamily A Member 1,CYP11A1)、类固醇生成急性调节蛋白(Steroidogenic Acute Regulatory Protein,STAR)表达的影响。结果显示:SIRT3基因在黔北麻羊不同月龄(1、3、6、9、12月龄)睾丸组织中均有表达,在9月龄的表达量最高、1月龄表达量最低,随着年龄增长,睾丸组织中SIRT3基因的表达量先增加后降低。过表达SIRT3,睾丸间质细胞内的抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达量极显著升高,促凋亡基因Bax、Caspase-3 mRNA表达均无显著差异性;氧化应激基因CAT mRNA表达无显著差异性;激素相关基因CYP11A1 mRNA表达上调但无显著差异性、STAR mRNA表达极显著提高。推测过表达SIRT3能增加Bcl-2基因的表达量,从而提高睾丸间质细胞抗凋亡能力,并通过上调CYP11A1基因和STAR基因的表达量,来促进睾丸相关生殖激素的分泌。
关键词:黔北麻羊;;SIRT3基因;;睾丸间质细胞;;表达调控
基金资助:贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2021]一般151);; 贵州省高层次创新型“百”层次人才项目(黔科合平台人才-GCC[2022]021-1)