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作者：苗喜云;展俊平;孟庆良;左瑞庭;马俊福;范围;王慧莲;
单位：河南省中医院风湿病科;
摘要：目的 研究紫苏醛(PAH)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖和凋亡的作用及其机制。方法 将MH7A细胞分为5组：对照组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组、TNF-α+PAH组、TNF-α+PAH+空载体(Vector)组、TNF-α+PAH+小窝蛋白(Caveolin, Cav)-1组；其中对照组细胞不做处理，TNF-α组细胞经20 ng/ml TNF-α处理，TNF-α+PAH组细胞经PAH处理后再用TNF-α处理，TNF-α+PAH+Vecotr组和TNF-α+PAH+Cav-1组分别在TNF-α+PAH组基础上转染Vector对照或Caveolin-1过表达载体。CCK-8检测细胞活力；膜联蛋白(Annexin)Ⅴ-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)方法检测细胞凋亡；Western印迹检测半胱天冬酶(caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、Caveolin-1和p65蛋白表达量。网络药理学分析PAH作用RA的靶点。结果 与对照组相比，TNF-α组可显著抑制MH7A细胞凋亡(P<0.05);TNF-α+PAH组与TNF-α组比较，MH7A细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。PAH可显著上调MH7A细胞中caspase-3和Bax蛋白表达量，下调Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)。网络药理学分析得到107个PAH作用靶点，与369个RA相关靶点取交集，得到12个共同靶点，Caveolin-1是其中一个靶点。与对照组相比，TNF-α组Caveolin-1及其下游蛋白p-p65蛋白表达量显著升高(P<0.05)。PAH可显著抑制Caveolin-1和p65的磷酸化水平(P<0.05)。Caveolin-1可逆转PAH对MH7A细胞凋亡的促进作用，表现为与TNF-α+PAH+Vector组相比，TNF-α+PAH+Cav-1组caspase-3及Bax蛋白表达量显著下降(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量显著上升(P<0.05)。另一方面，过表达Caveolin-1可显著抵消PAH对MH7A细胞活力的抑制作用(P<0.05)。结论 PAH通过Caveolin-1/核转录因子(NF)-κB抑制MH7A细胞增殖，促进细胞凋亡。PAH可能对RA具有治疗作用。
关键词：紫苏醛;;小窝蛋白-1;;类风湿关节炎;;增殖;;凋亡
基金资助：国家自然科学基金(81804050);; 河南省中医药科学研究专项课题(2019ZY2060);; 河南省中医药拔尖人才培养项目(2021-15)
