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作者：杨永鲜;陆情梅;冉铭;刘彬;周明帅;温晓艳;赵佳福;
单位：贵州大学动物科学学院;贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室;贵州省吉尔斯循环农业有限公司;
摘要：为验证miR-7和miR-30-5p对贵州黑山羊CTSK基因的调控效率及其对产羔基因的影响，通过生物软件筛选出调控CTSK效率最高的2条miRNAs:miR-7和miR-30-5p；将2条miRNAs转染至卵巢颗粒细胞，并于转染后24 h和48 h分别提取细胞总RNA，采用qRT-PCR法分别检测2条miRNAs在转染24 h和48 h的表达效率；同时检测miR-7和miR-30-5p过表达对CTSK基因及产羔相关基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B表达水平的影响。实验结果表明：转染miR-7和miR-30-5p至卵巢颗粒细胞24 h后，2条miRNAs的表达水平均极显著高于对照组（NC组）；转染48 h后，miR-30-5p表达水平极显著低于NC组，而miR-7与NC组相比无显著性差异。此外，过表达2条miRNAs对CTSK基因和繁殖相关基因的影响发现，与NC组相比，转染miR-7 24 h后能极显著抑制CTSK的表达，且上调产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15的表达；而转染miR-30-5p对CTSK的表达无明显抑制作用，但极显著上调了产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B的表达。综上可见，与miR-30-5p相比，miR-7更有可能通过抑制CTSK表达来促进产羔相关基因的表达，进而影响贵州黑山羊繁殖性能。本研究结果为后续研究miR-7和miR-30-5p影响贵州黑山羊繁殖性状的分子机制奠定了基础。
关键词：贵州黑山羊;miRNA;卵巢颗粒细胞;繁殖基因
基金资助：国家级大学生创新创业训练计划项目（202110657012）; 贵州大学引进人才科研项目（贵大人基合字[2020]074号）; 贵州省科技计划项目（黔科合支撑[2022]一般089）; 黔南州农业攻关项目（黔南科合（2021）27号）
