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作者：房美钰;张乔;郭丽;任丽丽;
单位：中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所;
摘要：本研究针对病毒多抗原、多抗体亚型检测的需求，基于悬浮芯片技术建立了一种可同时检测多种抗原蛋白多种抗体亚型的多重检测方法，为血清抗体特征的评估提供了一种高通量、快速的技术手段。以新冠病毒为研究模型，选用荧光编码微球作为反应载体，通过化学偶联技术将新冠病毒的核衣壳蛋白（Nucleocapsid, N）、刺突蛋白S2亚基（spike S2, S2）、受体结合域（Receptor binding domain, RBD）以及N端结构域（N-terminal domain, NTD）固定于微球表面。优化血液样本的稀释倍数和与微球的孵育时间后，采用生物素标记的小鼠抗人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亚型抗体作为检测二抗，建立针对各IgG亚型的标准品体系，并根据中位荧光强度（Median FluorescenceIntensity, MFI）对血样中的抗体亚型进行定量分析。所建立的检测体系可同时实现对SARS-CoV-2的N、NTD、RBD及S2四种抗原IgG亚型抗体的检测。其中，N-IgG1、NTD-IgG1、RBD-IgG1和S2-IgG1的检测灵敏度分别为84.38%、93.75%、90.63%和96.88%，特异度分别为100%、94.44%、100%和100%。本研究成功构建了一种基于悬浮芯片的多重检测体系，能够高效检测新冠病毒N、NTD、RBD与S2四种抗原对应的IgG亚型，适用于血样中抗体亚型分布特征的通量分析。
关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2;;悬浮芯片;;抗体亚型
基金资助：北京市自然科学基金（项目号：L222055）,题目：新冠肺炎康复者接种疫苗后的获得性免疫特征研究~~
