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作者：贺小月;楚菡;傅亦娴;赵钰萍;廖婧杉;杨净思;赵婷;
单位：中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所;中国医学科学院呼吸和共病全国重点实验室;昆明市新发突发高致病性病原体疫苗研发和产业化企业科技创新中心;香港中文大学(深圳);
摘要：新型脊髓灰质炎（脊灰）疫苗的构建和病毒减毒机制的探索需要建立脊灰病毒的反向遗传学操作平台。本研究以p GEM T-easy为载体构建Sabin株I型全长c DNA感染性克隆质粒。经体外转录为RNA后转染至Vero细胞进行病毒拯救，48h后观察到明显的细胞病变效应，获得Sabin株I型拯救病毒，并对拯救病毒的各项生物学特征进行观察和验证。拯救病毒的中和活性与Sabin株I型母株相同，病毒感染性滴度为1×10~(9 )TCID_(50)/m L，保留了在Vero细胞中复制的特性，与母株相比具有相似的生长曲线，在12～36 h病毒呈指数增长，在36 h复制达到最高峰。透射电子显微镜检测Sabin株I型拯救病毒，可见20～30 nm二十面体病毒颗粒。本研究成功构建脊灰Sabin株I型全长感染性克隆载体，获得脊灰Sabin株I型拯救病毒，为进一步研究脊灰病毒的致病机制及新型疫苗的研发提供了技术平台。
关键词：脊髓灰质炎病毒;;反向遗传学;;病毒拯救
基金资助：云南省基础研究专项面上项目(项目号:202401AT070147),题目:构建脊髓灰质炎病毒Sabin1株疫苗载体及其在手足口减毒活疫苗研发中的初步应用;; 云南省科技人才与平台计划,“中青年学术和技术带头人后备人才项目”(项目号:202305AC160009),题目:中青年学术和技术带头人后备人才项目赵婷;; 云南省重大科技专项计划(项目号:202002AA100009),题目:云南省创新疫苗技术与产业转化研发平台~~
