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作者：舒畅;李梦哲;翟程程;赵志敏;单徐畅;邴佳洛;祁振勇;邓瑶;翟德胜;谭文杰;
单位：传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室;公共卫生学院新乡医学院;
摘要：构建西尼罗病毒（West nile virus,WNV）与基孔肯雅病毒（Chikungunya virus, CHIKV）的新型双价重组DNA疫苗并在小鼠中评价其免疫原性。本研究以WNV的prM-E蛋白和CHIKV的C-E3-E2-6K-E1或E3-E2-6K-E1蛋白为靶抗原，构建了WNV和CHIKV双价重组DNA疫苗VRC-PrME-2A-CE和VRC-PrME-2A-E。转染HEK293T细胞后通过Western blot验证目的蛋白的表达。两剂次同源免疫小鼠，通过ELISA和Elispot进行体液与细胞免疫检测，并与表达WNV-XJ11129-3株的prM-E蛋白的WNV单价DNA疫苗VRC-prME和表达CHIKV 181/clone25的C-E3-E2-6K-E1蛋白的CHIKV单价DNA疫苗VRC-CE进行比较。结果显示，双价DNA疫苗构建成功。重组双价DNA疫苗单剂或加强免疫小鼠后均能诱导较高水平抗原特异性IgG，且与单价疫苗滴度相当。细胞免疫检测结果显示：加强免疫后VRC-PrME-2A-CE表现出针对CHIKV E1和CHIKV E2最高的分泌IFN-γ的T细胞水平，但与单价疫苗VRC-CE无统计学差异。本研究成功构建两款针对WNV和CHIKV的双价DNA疫苗，免疫小鼠后可以诱导产生良好的体液和细胞免疫应答，本研究为新型WNV和CHIKV双价基因工程疫苗的研发应用提供了实验参考。
关键词：西尼罗病毒;;基孔肯雅病毒;;DNA疫苗;;小鼠;;免疫原性
基金资助：国家重点研发计划项目（2022YFC2304100）,题目：新冠与流感等大流行风险病原体多肽疫苗的研制~~
