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作者：石鑫泰;朱昱茜;石正旺;罗俊聪;席韬;张帆;何印娣;李帅鹏;郑海学;田宏;
单位：中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;甘肃农业大学动物医学院;;
摘要：本研究旨在开发一种用于检测南非2型口蹄疫病毒（Foot-and-mouth sisease virus south African territory 2,FMDV-SAT2）抗体的简便、迅速、高特异性和灵敏性的胶体金免疫层析方法。该方法利用胶体金颗粒标记的VP1蛋白作为标记抗原，并在硝酸纤维素膜上固定VP1蛋白及其单克隆抗体（Monoclonal antibody,m Ab），分别形成检测线（T线）和质量控制线（C线）。通过一系列优化试验，胶体金标记VP1蛋白的最适p H、标记量分别为8.0和24μg/m L,C线的喷膜浓度为1.5 mg/m L,T线的喷膜浓度为0.2 mg/m L，可在12～15 min内完成检测，用于检测FMDV-SAT2抗体。结果显示，研制的胶体金试纸条与塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）、O型口蹄疫病毒（FMDV-O）、A型口蹄疫病毒（FMDV-A）的灭活血清以及南非1型口蹄疫病毒（FMDV-SAT1）、南非3型口蹄疫病毒（FMDV-SAT3)VP1蛋白免疫的兔血清均无交叉反应；与南非2型口蹄疫病毒VP1蛋白（FMDV-SAT2-VP1）免疫的兔血清的反应灵敏度可达1∶64；对110份FMDV-O型和50份FMDV-A型阳性猪血清样品进行检测，所有检测结果均显示为阴性；该试纸条在室温（18℃～25℃）和冷藏（4℃）环境下可分别保持稳定6个月和9个月。结果表明，本研究研发的胶体金免疫层析试纸条展现出高度的灵敏性和特异性，同时具备检测快速、操作便捷、结果直观等特点，对FMDV-SAT2的现场检测具有实际应用价值。
关键词：南非2型口蹄疫病毒;;胶体金试纸条;;抗体检测方法
基金资助：国家自然科学基金重点项目(项目号:32330107),题目:口蹄疫病毒从牛适应到猪的嗜性变异机制;; 2022年甘肃省创新联合体项目(项目号:22ZD6NA012),题目:家畜重要疫病诊断研制与产业化;; 十四五广东省揭榜挂帅项目(项目号:2023SDZG02),题目:重大动物疫病新型综合防控技术;; 国家生猪技术创新中心先导科技项目(项目号:NCTIP-XD/C03),题目:疾病与生物安全防控创新团队基本建设任务;; 甘肃省科技重大专项(项目号:23ZDNA007),题目:动物疫病防控关键技术
