来源：期刊VIP网 时间：
作者：李昊洋;张风梅;刘莉;刘会荣;杨舒然;
单位：河南中医药大学;河南中医药大学第二附属医院;
摘要：本研究的目的是探究黄芩素拮抗单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus 1,HSV-1）诱导的角膜新生血管生成的功能和机制。将人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）随机分为阴性对照（Mock）组、HSV-1组、黄芩素低剂量（25μmol·L~(-1)）组、黄芩素高剂量（100μmol·L~(-1)）组，除对照组外的其余各组细胞均用感染复数（MOI）为1的HSV-1感染24h。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8）法评估不同剂量（12.5、25、50、100μmol·L~(-1)）黄芩素处理或不同滴度（0.1、1、10 MOI)HSV-1感染24h后的细胞毒性反应，并检测12.5、25、50、100μmol·L~(-1)黄芩素处理24h后对HSV-1诱导的HUVECs活力的影响。采用Transwell实验检测各组HUVECs的迁移；逆转录定量PCR(RT-q PCR）用于检测各组HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA）、血小板-内皮细胞黏附分子1(PECAM1/CD31）、白细胞介素-17A(IL-17A）的m RNA表达水平。采用分子对接分析验证黄芩素与IL-17A蛋白之间的结合活性。本实验结果显示，与Mock组相比，黄芩素处理组的HUVECs活力未见显著变化；而HSV-1感染组的HUVECs活力和迁移显著增强，VEGFA、CD31和IL-17的m RNA表达显著上调。与HSV-1组相比，黄芩素低剂量和高剂量干预处理均抑制了HSV-1诱导的HUVECs活力和迁移，并降低了VEGFA、CD31和IL-17的m RNA表达。此外，分子对接分析表明，黄芩素能够与IL-17A蛋白稳定结合，结合亲和力=-7.0 kcal·mol~(-1)。总的来说，我们的研究表明，黄芩素通过靶向抑制IL-17A通路抑制HSV-1诱导的HUVECs血管形成。
关键词：HSV-1;;黄芩素;;角膜新生血管生成;;单纯疱疹性角膜炎;;VEGFA
基金资助：项目名称：国家重点研发计划项目（项目号：2022YFC3502504）,题目：防控方案示范区应用研究及多维度数据集成分析~~
