来源:期刊VIP网 时间:
作者:汤子怡;阳诗盈;杨天珍;刘闻强;钟江雪;尹俐;
单位:重庆理工大学药学与生物工程学院生物制药系;
摘要:目的:探讨百克敏对小鼠精母细胞GC-2铁死亡的影响,阐明百克敏是否能引起雄性生殖毒性。方法:小鼠精母细胞GC-2分为对照组(普通培养基)、低剂量百克敏组(0.8??mol·L~(-1)百克敏)、中剂量百克敏组(1.6??mol·L~(-1)百克敏)和高剂量百克敏组(2.4??mol·L~(-1)百克敏)。给予百克敏处理24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量百克敏作用下GC-2细胞活性,JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测各组GC-2细胞中线粒体膜电位,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测各组GC-2细胞中SOD活性,丙二醛(MDA)检测试剂盒检测各组GC-2细胞中MDA水平,还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型GSH(GSSG)检测试剂盒检测各组GC-2细胞中GSH和GSSG水平,并计算GSH/GSSG比值;Western blotting法检测各组GC-2细胞中血红素氧合酶1(HO-1)、铁蛋白重链1(FTH1)和GSH过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,百克敏剂量≥1.0μg·L~(-1)各组GC-2细胞活性均降低(P<0.01),设置其低、中和高剂量分别为0.8、1.6和2.4μmol·L~(-1)百克敏。JC-1法,与对照组比较,中和高剂量百克敏组GC-2细胞线粒体膜电位均降低。与对照组比较,低、中和高剂量百克敏组GC-2细胞中SOD活性均降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01)。与对照组比较,低、中和高剂量百克敏组GC-2细胞中GSH水平均降低(P<0.01)、GSSG水平均升高(P<0.01),且GSH/GSSG比值均降低(P<0.01)。与对照组比较,低、中和高剂量百克敏组GC-2细胞中HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),FTH1和GPX4蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:百克敏能够诱导小鼠精母细胞GC-2铁死亡。
关键词:百克敏;;小鼠精母细胞;;铁死亡;;谷胱甘肽过氧化物酶4;;氧化应激
基金资助:国家自然科学基金青年基金项目(81402655);; 重庆市科技局自然科学基金面上项目(cstc2019jcyj-msxmX0427)