来源：期刊VIP网 时间：
作者：杨如意;王煜灵;杨巍;
单位：北华大学医学技术学院临床免疫学检验教研室;
摘要：目的:探讨人参果胶醇沉组分(WGPA)对小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDCs)表型和功能的影响。方法:采用水提、乙醇沉淀和离子交换层析法提取3种WGPA,分别为30%醇沉组分(WGPA_(30))、50%醇沉组分(WGPA_(50))和70%醇沉组分(WGPA_(70))。原代培养小鼠BMDCs,并分为未成熟BMDCs和成熟BMDCs。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测不同浓度WGPA作用下成熟BMDCs增殖活性,确定有效WGPA及其适宜浓度。对有效醇沉组分进行相对分子质量、红外光谱和单糖组成分析。将未成熟BMDCs和成熟BMDCs均随机分为对照组、脂多糖(LPS)组(加入LPS干预)和WGPA组(加入有效WGPA干预)。采用流式细胞术检测各组成熟BMDCs表面CD80、CD86和主要组织相容性抗原-Ⅱ(MHC-Ⅱ)表达水平,荧光微球吞噬实验检测各组未成熟BMDCs吞噬效率,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测各组成熟BMDCs培养上清中IL-6、IL-12和TNF-α水平。结果:CCK-8法,与对照组比较,800和1 600mg·L~(-1)WGPA_(30)组细胞增殖活性均明显升高(P<0.01),WGPA_(50)和WGPA_(70)作用下各组细胞增殖活性无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);选用800 mg·L~(-1) WGPA_(30)进行后续实验。结构分析,WGPA_(30)相对分子质量约为24 230,是由α-构型糖苷键连接而成的吡喃糖,主要单糖组成包括葡萄糖醛酸、木糖、葡萄糖和半乳糖。流式细胞术,与对照组比较,LPS组和WGPA_(30)组成熟BMDCs表面MHC-Ⅱ、CD86及CD803表达水平均明显升高(P<0.01);与LPS组比较,WGPA_(30)组成熟BMDCs表面MHC-Ⅱ、CD86和CD803表达水平均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,LPS组和WGPA_(30)组未成熟BMDCs吞噬活性均明显降低(P<0.05)。ELISA法,与对照组比较,LPS组和WGPA_(30)组成熟BMDCs上清中IL-6、IL-12及TNF-α水平均明显升高(P<0.01);与LPS组比较,WGPA_(30)组成熟BMDCs上清中IL-12和TNF-α水平明显降低(P<0.01),IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:WGPA_(30)是由α-构型糖苷键连接而成的吡喃糖,包含葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸等主要活性成分,相对分子质量约为24 230。WGPA_(30)可通过促进小鼠BMDCs增殖和细胞因子IL-6、IL-12及TNF-α释放,提高BMDCs表面分子MHC-Ⅱ、CD86及CD80表达以及降低BMDCs吞噬效率等途径,促进BMDCs成熟,调节BMDCs活性。
关键词：人参;;人参果胶;;醇沉组分;;骨髓源性树突状细胞;;脂多糖
基金资助：吉林省科技厅科技发展计划项目(YDZJ202301ZYTS181);; 吉林省教育厅大学生创新创业项目(202310201143)
