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作者：胡屹硕;刘长城;刘洋;贾雪娇;刘梦琦;宋彤彤;郭晗;赵微;
单位：锦州医科大学基础医学院病原生物学实验室;辽宁省肿瘤医院检验科;辽宁省人类表型组研究重点实验室;
摘要：目的:探讨轮状病毒(RV)毒株SA11持续性感染对白细胞介素10 (IL-10)基因缺陷(IL-10~(-/-))小鼠肠道炎症的动态调控作用,并阐明其潜在的作用机制。方法:常规培养猴胚肾MA104细胞,采用间接免疫荧光法检测MA104细胞中SA11病毒滴度。将20只SPF级野生型C57BL/6(WT-B6)小鼠作为对照组,20只IL-10基因敲除的C57BL/6小鼠(IL-10~(-/-)-B6小鼠)作为实验组。通过连续42d每日灌胃1×10~6FFU·mL~(-1) SA11悬液建立持续感染模型,每周采集2组小鼠粪便和肠道组织样本。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组小鼠粪便中RV衣壳蛋白VP6基因拷贝数及结直肠组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β (TGF-β) mRNA表达水平,HE染色观察2组小鼠十二指肠和空肠组织病理形态表现。结果:间接免疫荧光法检测计算得到SA11病毒的滴度为1×10~6 FFU·mL~(-1)。在RV持续感染的前21 d,IL-10~(-/-)-B6组和WT-B6组小鼠粪便中VP6基因拷贝数均维持在较低水平,2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。在持续感染28d后,与WT-B6组比较,IL-10~(-/-)-B6组小鼠粪便中VP6基因拷贝数明显升高(P<0.05)。与感染前比较,感染RV后WT-B6组小鼠结直肠组织中IL-1β和TNF-α mRNA表达水平明显升高(P<0.001),IL-10~(-/-)-B6组小鼠结直肠组织中IL-1β和TNF-α mRNA表达水平明显降低(P<0.001),2组小鼠结直肠组织中TGF-β mRNA表达水平均明显升高(P<0.001)。结论:RV毒株SA11持续性感染可改变IL-10~(-/-)缺陷小鼠的肠道免疫微环境,表现为小鼠结直肠组织中IL-1β和TNF-α表达下调及TGF-β表达上调,并减轻肠道炎症,提示RV可能通过重塑肠道免疫平衡影响肠道炎症的发展进程。
关键词：轮状病毒;;白细胞介素10;;基因敲除;;细胞因子;;胃肠道感染
基金资助：辽宁省科技厅自然科学基金2023年度联合基金项目（2023-MSLH-046）;; 复旦大学医学分子病毒学教育部/卫健委重点实验室2024年度开放课题项目（FDMV-2024002）
