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作者：翟丽;陈孟;罗建波;张爱利;王良晓;魏颖;张曦;
单位：昆明医科大学第三附属医院云南省肿瘤医院北京大学肿瘤医院云南医院医学检验科;云南省昆明市官渡区妇幼健康服务中心检验科;
摘要：目的:探讨微小RNA-214-3p(miR-214-3p)和果蝇zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)之间的靶向关系,并阐明其对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法:将人卵巢癌SKOV3细胞分为对照组、mimics阴性对照(NC)组、miR-214-3p mimics组、miR-214-3p mimics+过表达NC (OE-NC)组和miR-214-3p mimics+过表达EZH2 (OE-EZH2)组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中miR-21 4-3p和EZH2 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中EZH2蛋白表达水平。构建含EZH2野生型(WT)或突变型(MT)报告质粒,与miR-214-3p mimics或NC共转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞荧光素酶活性。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测各组细胞活性,Transwell小室实验检测各组侵袭细胞数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率和细胞周期分布。结果:与对照组和mimics NC组比较,miR-214-3p mimics组细胞中miR-214-3p表达水平明显升高(P<0.05),EZH2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与miR-214-3p mimics组比较,miR-214-3p mimics+OE-EZH2组细胞中miR-214-3p表达水平明显降低(P<0.05),EZH2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与pGL3-EZH2-WT+NC组比较,pGL3-EZH2-WT+miR-214-3p mimics组荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。与对照组和mimics NC组比较,miR-214-3p mimics组细胞活性明显降低(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞周期G_1期细胞百分率明显升高(P<0.05)。与miR-214-3p mimics组比较,miR-214-3p mimics+OE-EZH2组细胞活性明显升高(P<0.05),侵袭细胞数明显增加(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:miR-214-3p可靶向下调EZH2表达,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。EZH2过表达可拮抗miR-214-3p的抑癌作用,进一步证实了二者间的靶向调控关系。
关键词：微小RNA-214-3p;;果蝇zeste基因增强子人类同源物2;;卵巢肿瘤;;细胞增殖;;细胞侵袭;;细胞迁移
基金资助：云南省科技厅应用基础研究计划项目（202101AY070001-165）;; 云南省教育厅科学研究基金项目（2024J0330）
