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作者：蒋明明;周芳芳;谷雪妹;李亚男;徐旻一;王蕾;
单位：上海市第八人民医院检验科;
摘要：目的 探究小檗碱对临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜形成的影响及潜在机制。方法收集上海市第八人民医院2023年1-12月临床分离的95株MRSA,通过聚合酶链式反应(PCR)及多重PCR检测14个生物膜相关基因携带情况；采用微量肉汤稀释法测定小檗碱最低抑菌浓度(MIC),结合结晶紫染色、荧光显微镜、刚果红琼脂平板和细胞外DNA(eDNA)评估其抗生物膜效果；通过实时荧光定量逆转录PCR检测9个生物膜相关基因转录水平变化。结果 95株MRSA均携带eno、clfA、clfB和icaA基因，分布最为广泛的基因谱为bbp-eno-ebpS-fnbA-fib-clfA-clfB-icaA-sasG,且其中29株菌具有强生物膜形成能力表型。小檗碱MIC范围为64～1 024μg/ml。浓度为1/2 MIC的小檗碱能抑制MRSA生物膜的形成(P<0.001),且生物膜抑制率在MIC≥512μg/ml组高于≤128μg/ml组和256μg/ml组(均P<0.05)。荧光显微镜观察发现，生物膜的荧光强度随小檗碱浓度升高而减弱。小檗碱可减少淀粉样纤维形成和eDNA的释放，并下调icaA、sasG、ebpS、fib、eno、clfA、clfB、bbp和fnbA基因转录水平(P<0.05)。结论 小檗碱可通过下调相关基因表达、干扰淀粉样纤维形成及阻断eDNA释放抑制MRSA生物膜，为抗MRSA生物膜药物开发提供实验依据。
关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;;小檗碱;;生物膜;;细胞外DNA;;淀粉样纤维
基金资助：上海市徐汇区医学重点学科(SHXHZDXK202322);; 江苏大学医教协同创新基金(JDYY2023121)
