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作者：张凯茵;姚凤云;韩瑶瑶;姜劼琳;王琳;李雯;杨红芳;张桓源;崔言坤;
单位：江西中医药大学中医学院;江西中医药大学方-证研究中心;南昌市方-证对应免疫及代谢疾病防治重点实验室;
摘要：目的 探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法 CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆汤低、中、高剂量组(5%、10%、20%),给予不同浓度血清干预48 h后收集样本。油红O染色检测脂质积累，葡萄糖氧化酶(GOD)法检测细胞葡萄糖消耗量，RT-qPCR法检测细胞IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4、IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA表达，Western blot法检测细胞INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、FOXO1、GLUT4蛋白表达。结果 不同浓度加味温胆汤含药血清干预3T3-L1前脂肪细胞24、48、72 h后，对细胞活性无显著影响(P>0.05)。3T3-L1前脂肪细胞可在14 d内诱导为成熟脂肪细胞。与模型组比较，加味温胆汤各剂量组脂肪细胞脂质积累减少，IRS-1、IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA表达降低(P<0.01);加味温胆汤低剂量组PI3K、GLUT4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);加味温胆汤中剂量组GLUT4 mRNA表达升高(P<0.01),INSR、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05);加味温胆汤高剂量组干预24 h后，脂肪细胞葡萄糖消耗量增加(P<0.01),INSR、Akt、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 加味温胆汤可减少脂肪细胞脂质积累，激活PI3K/Akt/FOXO1信号通路，调节糖脂代谢，促进脂肪细胞代谢稳态。
关键词：加味温胆汤;;3T3-L1脂肪细胞;;肥胖;;糖脂代谢;;PI3K/Akt/FOXO1信号通路
基金资助：国家自然科学基金项目(82360897);; 江西省自然科学基金项目(20212BAB216007);; 江西省创新创业训练计划项目(S202410412070);; 江西省中医药管理局科技计划项目(2022A328)
