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作者：李佩如;盛璇;孙文秀;李润物;贡岳松;
单位：南京中医药大学;江苏鹏鹞药业新药创新中心;
摘要：目的 探究芒柄花素对H_2O_2诱导HT22细胞氧化应激损伤的改善作用。方法 选用小鼠海马神经元HT22细胞，通过MTT法确定芒柄花素对H_2O_2诱导HT22细胞氧化应激损伤的最佳保护浓度；以乳酸脱氢酶(LDH)泄露率、过氧化物歧化酶(SOD)活性评价细胞损伤程度和氧化应激能力改变；HE染色观察神经元细胞突触结构改变；活性氧(ROS)试剂盒检测ROS水平；RT-qPCR法检测Nrf2、Keap1、HO-1 mRNA表达；Western blot法检测Nrf2/Keap1/HO-1信号通路蛋白(Nrf2、Keap1、HO-1)及神经元突触蛋白(PSD95、NR2B、NR1、NR2A)的表达。结果 与对照组比较，H_2O_2组HT22细胞活力、SOD活性降低(P<0.05,P<0.01),LDH泄露率及ROS水平升高(P<0.05,P<0.01),损伤突触结构，Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Keap1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),PSD95、NR2B、NR2A、NR1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与H_2O_2组比较，10μmol/L为芒柄花素的最佳保护浓度，H_2O_2+芒柄花素组细胞突触结构改善，SOD活性增加(P<0.01),LDH泄露率及ROS水平降低(P<0.05,P<0.01),Nrf2、HO-1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),Keap1 mRNA表达降低(P<0.01),Nrf2、HO-1、PSD95、NR2B、NR2A、NR1蛋白表达升高(P<0.05),Keap1蛋白表达降低(P<0.01)。结论 芒柄花素可以改善H_2O_2诱导HT22细胞氧化应激损伤，其机制可能与上调Nrf2/Keap1/HO-1信号通路有关。
关键词：芒柄花素;;氧化应激损伤;;HT22细胞;;阿尔兹海默病;;H_2O_2;;Nrf2/Keap1/HO-1信号通路
基金资助：江苏省双创计划项目(013033004004A);; 南京中医药大学高级人才科研启动项目(013074004016)
