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作者：李雪军;王淑敏;陈秀峰;刘安琪;姜之炎;张宏宇;
单位：河南中医药大学第一附属医院儿科医院;河南中医药大学儿科医学院;上海中医药大学附属龙华医院;
摘要：目的 探讨龙牡清心合剂对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的神经保护作用。方法 以6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞多巴胺(DA)能神经元损伤，将细胞分为空白血清组、模型组、PKA抑制剂(H-89)组、龙牡清心合剂中、高剂量组和龙牡清心合剂中、高剂量+H-89组，含药血清干预24 h后，收集上清液及细胞，ELISA法检测上清液DA、cAMP水平，Western blot和RT-qPCR法检测细胞中多巴胺D1受体(DRD1)、G蛋白α亚基(Gαs、Gαolf)、PKA、CREB、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和mRNA相对表达。结果 与模型组比较，龙牡清心合剂各剂量组和龙牡清心合剂各剂量+H-89组细胞DA、cAMP水平升高(P<0.01);龙牡清心合剂各剂量组和高剂量+H-89组细胞DRD1、PKA、Gαs、Gαolf、p-CREB、BDNF及中剂量+H-89组PKA、Gαs、p-CREB蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);龙牡清心合剂各剂量组细胞DRD1、PKA、Gαs、Gαolf、CREB、BDNF mRNA和各剂量+H-89组细胞DRD1、PKA、Gαs mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 龙牡清心合剂可能通过激活cAMP/PKA-CREB信号通路上调DA水平，发挥对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞的神经保护作用。
关键词：龙牡清心合剂;;SH-SY5Y细胞;;神经递质;;cAMP/PKA-CREB信号通路;;6-OHDA
基金资助：国家自然科学基金青年基金项目(82405474);; 上海市2023年度“科技创新行动计划”医学创新研究专项项目(23Y21920100);; 上海市进一步加快中医药传承创新发展三年行动计划(2021—2023年)项目[ZY(2021-2023)-0206-01];; 上海市临床重点专科建设项目(中医专业)(shslczdzk04102);; 龙华医院科技创新项目(KY22059)
