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作者：李娜;李占强;刘煊炳;刘旭;谭大勇;
单位：青海大学附属医院眼科;青海大学高原医学研究中心;青海大学附属医院普通外科一科;
摘要：目的 探讨山柰酚对低氧所致大鼠视网膜微血管内皮细胞(rRMECs)损伤的保护作用。方法 采用CCK-8法筛选山柰酚保护rRMECs的有效浓度，流式细胞术检测细胞凋亡情况，DCFH-DA法检测ROS水平，ELISA法检测SOD活性和MDA水平，Western blot法检测eNOS、p-eNOS、c-Src、p-c-Src、Bax和Bcl-2蛋白表达，并测定NO水平。采用eNOS抑制剂L-NAME(10μmol/L)验证阻断eNOS/NO/c-Src信号后山柰酚对视网膜内皮细胞的作用。结果 在常氧条件下，山柰酚在小于32μmol/L的浓度下对rRMECs无毒性；与常氧组比较，低氧组(1%O_2,12 h)rRMECs活力降低(P<0.01),p-eNOS蛋白表达升高(P<0.01)。与低氧组比较，山柰酚组细胞增殖增加(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),NO水平、SOD活性及Bcl-2、p-eNOS蛋白表达升高(P<0.01),ROS、MDA水平及Bax蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),p-eNOS和p-c-Src蛋白表达升高(P<0.01),而eNOS抑制剂L-NAME逆转了山柰酚对低氧致rRMECs氧化应激损伤的保护作用(P<0.01)。结论 山柰酚在低氧条件下通过活化eNOS/NO/c-Src信号通路对rRMECs发挥保护作用，抑制细胞凋亡，减少氧化应激，在治疗低氧相关视网膜血管损伤中具有潜在应用价值。
关键词：山柰酚;;rRMECs;;低氧损伤;;氧化应激;;eNOS/NO/c-Src信号通路
基金资助：青海省科技计划项目(2023-ZJ-768);; 2024年青海省“昆仑英才·高端创新创业人才”项目(2024年)
