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作者：陈敏;朱慧艳;陶静;徐奕鹏;
单位：新疆维吾尔自治区人民医院康复医学科;
摘要：目的：探讨甜菜碱在大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）氧糖剥夺损伤中的作用，阐明甜菜碱对磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B (AKT)通路的调节机制。方法：选取5只7日龄SD大鼠，获取大鼠BMECs，在低氧低糖条件下制备BMECs氧糖剥夺模型，分为模型组，低、中和高剂量甜菜碱组及阳性对照组，另设空白对照组（不进行造模），空白对照组和模型组大鼠BMECs给予新鲜培养基，阳性对照组大鼠BMECs给予终浓度为10μmol·L-1的尼莫地平，低、中和高剂量甜菜碱组大鼠BMECs分别给予终浓度为0.5、1.0及2.0 mmol·L-1的甜菜碱。采用CCK-8法检测培养12、24和48 h时各组大鼠BMECs存活率，试剂盒检测各组大鼠BMECs中乳酸脱氢酶（LDH）活性和三磷酸腺苷（ATP）水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠BMECs上清液中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素（IL）-6、IL-1β和IL-18水平，试剂盒检测各组大鼠BMECs中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平，使用跨内皮电阻（TEER）分析仪检测各组大鼠BMECs的TEER值，使用插入式细胞培养器检测各组大鼠BMECs的辣根过氧化物酶（HRP）通透率，缺口末端标记（TUNEL）染色法检测各组大鼠BMECs凋亡率，Western blotting法检测各组大鼠BMECs中磷酸化PI3K (p-PI3K)/PI3K和磷酸化AKT (p-AKT)/AKT比值。结果：与空白对照组比较，模型组大鼠BMECs存活率，SOD活性，ATP水平和TEER值及大鼠BMECs中p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值均明显降低（P<0.05）;LDH活性，TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18和MDA水平，BMECs凋亡率和HRP通透率均明显升高（P<0.05）。与模型组比较，低、中和高剂量甜菜碱组及阳性对照组大鼠BMECs存活率，SOD活性，ATP水平和TEER值及大鼠BMECs中p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值均明显升高（P<0.05）;LDH活性、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18和MDA水平，BMECs凋亡率和HRP通透率均明显降低（P<0.05）。结论：甜菜碱能够修复大鼠BMECs氧糖剥夺损伤，抑制BMECs氧化损伤及凋亡，改善大鼠BMECs通透性，其机制可能与调节PI3K/AKT通路有关。
关键词：甜菜碱;;氧糖剥夺;;再灌注损伤;;磷脂酰肌醇3激酶;;蛋白激酶B
基金资助：新疆维吾尔自治区科技厅自然科学基金项目（2022D01C113,2022D01C125）
