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作者：夏春兰;冯夏;曹烨民;梁志强;乐意;徐洪涛;祁菲;李骥;
单位：上海中医药大学;上海中医药大学附属上海市中西医结合医院脉管科;
摘要：目的 考察凉血和营方含药血清(LXHY-MS)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响。方法 CCK-8法、DCFH-DA荧光探针法和Western blot法筛选LPS造模浓度以及LXHY-MS给药浓度。将HUVECs分为正常组、模型组和LXHY-MS组，自动生化分析仪检测SOD活性，比色法检测MDA水平，Western blot法检测ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-α、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达，高内涵检测线粒体活性氧(mROS)水平及HUVECs对人单核细胞白血病细胞(THP-1)的招募作用。采用JAK2/STAT3通路抑制剂(AG490),将HUVECs分为正常组、AG490组、LPS组、LPS+AG490组、LPS+LXHY-MS组和LPS+LXHY-MS+AG490组，Western blot法检测ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-α、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组HUVECs中SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.05),ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-α、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),mROS表达增强，招募的THP-1细胞增加。与模型组比较，LXHY-MS组SOD活性升高(P<0.05),MDA水平降低(P<0.01),ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-α、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),mROS表达减弱，招募的THP-1细胞减少。采用AG490后，与正常组比较，模型组ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-α、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较，各给药组相关蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 凉血和营方含药血清可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路保护HUVECs活化损伤。
关键词：凉血和营方;;类风湿性血管炎;;内皮细胞活化;;JAK2/STAT3信号通路
基金资助：上海市卫生健康委员会中医药科研项目任务书(2024QN010);; 上海市虹口区卫生健康委员会第二轮国医强优建设项目(HKGYQYXM-2022-07);; 2023年度上海中医药大学科技发展项目(23KFL088)
