来源:期刊VIP网 时间:
作者:严佳慧;刘小珍;马芸菲;石发吐买;杨红凤;魏一丹;陈水红;
单位:塔里木大学生命科学与技术学院塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室;
摘要:试验旨在探究内生真菌对宿主植物原卟啉原氧化酶的非同源性同源功能酶基因(HEMG)的影响。试验使用逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)克隆布顿大麦HEMG基因的蛋白质编码区(CDS)并完成测序;对得到的基因序列进行生物信息学分析,通过亚细胞定位技术确定HEMG蛋白的位置;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测新疆温宿县和甘肃临泽地区带内生真菌(GI、WI)和不带内生真菌(GF、WF)的布顿大麦,以及甘肃菌植入温宿的布顿大麦(HE2)和温宿菌植入甘肃的布顿大麦(HE3)中的HEMG基因的相对表达量。结果显示,克隆的HEMG基因CDS长度为927 bp,编码308个氨基酸残基。HEMG蛋白可能定位于细胞核,且无跨膜结构域和信号肽。布顿大麦HEMG基因与乌拉尔图小麦的HEMG基因同源性最高,达98.04%。GI的HEMG基因相对表达量显著高于GF(P<0.05),WI的HEMG基因相对表达量显著低于WF(P<0.05),HE3的HEMG基因相对表达量显著高于WI(P<0.05),HE2的HEMG基因的相对表达量显著低于GI(P<0.05)。研究表明,甘肃临泽地区菌株能够提高HEMG基因相对表达量,新疆温宿县菌株则起到抑制作用。
关键词:布顿大麦;;HEMG基因;;内生真菌;;基因克隆;;相对表达量
基金资助:国家自然科学基金项目(项目编号:32260356);; 大学生创新创业训练计划项目(项目编号:202410757070);; 塔里木大学研究生科研创新项目(项目编号:TDGRI202308);; 青海省科技厅重点实验室项目;; 青藏高原种质资源研究与利用实验室开放课题项目(项目编号:20238Y801)