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作者：付璐璐;邹颖刚;郑晓宇;张雪莹;张京顺;王敏;张嫱;郑连文;
单位：吉林大学第二医院生殖中心;东莞松山湖东华医院妇科;
摘要：目的：探讨胎盘表达转录因子1(Plet1)在来曲唑构建的多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠卵巢组织中的表达及其对大鼠卵巢颗粒细胞增殖调控作用，并阐明Plet1参与PCOS发病的可能机制。方法：取课题组前期研究采集的大鼠卵巢样本，分为对照组和PCOS组，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测2组大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA和蛋白表达水平。另取24只大鼠，采用阴道涂片鉴定将大鼠分为发情前期、发情期、发情后期及发情间期4组，RT-qPCR法检测不同发情周期大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA表达水平，免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织中Plet1表达定位。转染大鼠卵巢颗粒细胞，分为对照组、si-Plet1-rat-266组、si-Plet1-rat-383组和si-Plet1-rat-554组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性，采用RT-qPCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞中细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)和P53 mRNA表达水平。结果：RT-qPCR法检测，Plet1 mRNA在正常大鼠卵巢中表达，Plet1 mRNA表达水平在各发情周期组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学检测，Plet1蛋白在大鼠卵巢组织中表达定位主要在卵巢颗粒细胞和黄体细胞。与对照组比较，PCOS组大鼠卵巢中Plet1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞中Plet1 mRNA表达水平明显降低（P<0.01），且下降幅度最大。CCK-8法检测，与对照组比较，si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。与对照组比较，si-Plet1-rat-383组CDK6和P53 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：Plet1蛋白在正常大鼠卵巢组织中表达分布主要集中于卵巢颗粒细胞和黄体细胞。PCOS模型大鼠卵巢组织内Plet1基因表达下调，干扰Plet1基因表达可抑制大鼠卵巢颗粒细胞增殖。
关键词：多囊卵巢综合征;;胎盘表达转录因子1;;发情周期;;卵巢颗粒细胞;;细胞增殖
基金资助：吉林省科技厅科技发展计划项目（20210101462JC）
