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作者：滕欢欢;孙光;姜锐;孙立伟;刘建增;
单位：长春中医药大学药学院;长春中医药大学附属医院中医药研究中心;长春中医药大学东北亚中医药研究院中药所;
摘要：目的：探究生肌玉红膏提取物（SYOE）对斑马鱼皮肤创面愈合的促进作用，并阐明其作用机制。方法：取320条野生型AB系斑马鱼，于侧腹部切口建立创面模型后，随机分为对照组、低剂量SYOE组（置于含0.625 mg·L~(-1) SYOE的水中饲养）、高剂量SYOE组（置于含1.250 mg·L~(-1)SYOE的水中饲养）和尿囊素组（置于含1.000 mg·L~(-1)尿囊素的水中饲养），每组80条。分别于损伤后第7、14和21天拍照记录斑马鱼皮肤创面面积，计算创面愈合率。于不同时间点收集各组斑马鱼创面皮肤组织制作组织切片，采用HE染色观察第0、7、14和21天各组斑马鱼皮肤创面边缘宽度，天狼星红染色检测损伤后第2、4、6和8天各组斑马鱼皮肤创面组织中的胶原蛋白水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测损伤后第4天各组斑马鱼皮肤创面组织中Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析损伤后第4天各组斑马鱼皮肤创面组织中ColⅠ编码基因col1a1a、col1a1b、col1a2和α-SMA以及转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路关键因子tgfb1a、smad2和smad3a mRNA表达水平。结果：创面愈合评估，与对照组比较，损伤后第7、14和21天低剂量SYOE组、高剂量SYOE组及尿囊素组斑马鱼皮肤创面愈合率明显升高（P<0.05或P<0.01），其中高剂量SYOE组在第21天时斑马鱼皮肤创面愈合率达84%。HE染色，与对照组比较，损伤后第14和21天，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组及尿囊素组斑马鱼皮肤创面边缘宽度明显减小（P<0.05或P<0.01）。天狼星红染色，损伤后第6和8天，与对照组比较，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中胶原蛋白水平明显升高（P<0.01）。ELISA法检测，损伤后第4天，与对照组比较，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中ColⅠ及α-SMA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR法检测，损伤后第4天，与对照组比较，低剂量SYOE组斑马鱼皮肤创面组织中col1a1b、col1a2、α-SMA、tgfb1a和smad2 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中col1a1a、col1a1b、col1a2、α-SMA、tgfb1a、smad2及smad3a mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。结论：SYOE能够增加斑马鱼皮肤创面的胶原蛋白沉积，促进皮肤创面愈合，并提高TGF-β/Smad信号通路相关基因的表达水平。
关键词：生肌玉红膏提取物;;创面愈合;;斑马鱼;;胶原蛋白沉积;;转化生长因子β;;Smad
基金资助：吉林省科技厅科技发展计划项目(YDZJ202201ZYTS283);; 吉林省中医药管理局中医药科技项目(2022123)
