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作者：胡英;黄勇;
单位：海南医科大学第二附属医院生殖医学科;
摘要：目的：探讨短链脂肪酸（SCFAs）对多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢颗粒细胞损伤的改善作用，并阐明其可能的作用机制。方法：分别从PCOS患者和非PCOS患者的卵泡液中提取卵巢颗粒细胞，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测2种细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素（IL）-6和IL-18 mRNA和蛋白表达水平，Western blotting法检测2种细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和泛素结合蛋白p62表达水平。使用不同浓度（0、6、12、24和48 mmol·L~(-1)） 3种SCFAs乙酸钠（NaA）、丙酸钠（NaP）及丁酸钠（NaB）分别处理人卵巢颗粒细胞KGN，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测3种SCFAs作用后正常KGN细胞增殖活性。取人卵巢颗粒细胞KGN，分为对照组、脂多糖（LPS）组（1 mg·L~(-1) LPS）、NaA+LPS组（48 mmol·L~(-1) NaA+1 mg·L~(-1) LPS）、 NaP+LPS组（48 mmol·L~(-1) NaP+1 mg·L~(-1) LPS）、NaB+LPS组（48 mmol·L~(-1) NaB+1 mg·L~(-1) LPS）。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞上清液中雌二醇（E_2）和孕酮（P）水平，RT-qPCR法检测各组细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及p62蛋白表达水平。结果：与非PCOS患者比较，PCOS患者卵巢颗粒细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高（P<0.05）,p62蛋白表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较，经不同浓度（6、12、24和48 mmol·L~(-1)） NaA、NaP和NaB处理后各组KGN细胞增殖活性差异无统计学意义（P>0.05）。与LPS组比较，NaA+LPS组、NaP+LPS组和NaB+LPS组细胞增殖活性均升高（P<0.05），细胞上清液中E_2和P水平升高（P<0.05），细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18 mRNA表达水平降低（P<0.05）,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低（P<0.05）,p62蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：PCOS患者卵巢颗粒细胞中炎症因子水平升高，并诱导细胞自噬。SCFAs可改善炎症诱导下的卵巢颗粒细胞自噬性损伤，提高细胞增殖活性。
关键词：多囊卵巢综合征;;卵巢颗粒细胞;;短链脂肪酸;;炎症;;细胞自噬;;炎症因子
基金资助：海南省卫健委卫生健康行业科研项目（21A200178）
