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作者:徐昆;田晶;
单位:锦州医科大学附属第一医院心脏康复中心;锦州医科大学基础医学院免疫教研室;
摘要:目的:探讨早期记忆T淋巴细胞(T_M)在甲型流感病毒(H1N1) PR8感染小鼠后的变化情况,并阐明其意义。方法:将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组和流感病毒(PR8)组,每组16只。对照组小鼠鼻滴30μL无菌磷酸盐缓冲液(PBS),PR8组小鼠给予鼻滴2 LD_(50) PR8病毒液。于第10天处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织和淋巴结用于后续实验。HE染色观察2组小鼠肺组织病理形态表现,血凝试验、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和免疫荧光法检测小鼠肺组织病毒感染情况,流式细胞术检测2组小鼠BALF、肺组织和淋巴结中T淋巴细胞、效应性T淋巴细胞、中央型T_M淋巴细胞(T_(CM))和效应性T_M淋巴细胞(T_(EM))及核蛋白(NP)/聚合酶酸性蛋白(PA)特异性T_(EM)淋巴细胞百分率。结果:与对照组比较,PR8组小鼠肺组织出现明显的病理损伤,且肺组织病毒效价和NP蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与对照组比较,PR8组小鼠BALF和肺组织中CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、效应性CD4~+T淋巴细胞、效应性CD8~+T淋巴细胞、CD4~+T_(EM)淋巴细胞和CD8~+T_(EM)淋巴细胞百分率均明显升高(P<0.01)。与对照组比较,PR8组小鼠BALF和肺组织中CD4~+T_(CM)、CD8~+T_(CM)、CD4~+T_(EM)、CD8~+T_(EM)及NP/PA特异性CD4~+T_(EM)和CD8~+T_(EM)淋巴细胞百分率均明显升高(P<0.05或P<0.01),淋巴结中CD8~+T_(CM)淋巴细胞百分率明显升高(P<0.05)。结论:流感病毒感染可诱导机体T淋巴细胞增殖分化为效应性T淋巴细胞,在呼吸道黏膜局部早期建立保守表位NP/PA的特异性T_M淋巴细胞。
关键词:流感病毒;;记忆T淋巴细胞;;中央型记忆T淋巴细胞;;效应型记忆T淋巴细胞;;保守表位
基金资助:辽宁省教育厅基本科研面上项目(LJKMZ20221239);; 辽宁省科技厅联合计划面上项目(2025-MSLH-250)