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作者:刘鑫喆;王佳琦;戴俊丽;
单位:上海市公共卫生临床中心口腔科;佳木斯大学附属口腔医院牙体牙髓病科;
摘要:目的 分析胡黄连苷(P)Ⅱ调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号轴对舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法 用CCK8法检测不同浓度PⅡ处理的CAL-27细胞24 h增殖和半抑制浓度(IC50),将CAL-27细胞随机分为6组,常规培养CAL-27细胞为CAL-27组,10、5、1μg/ml PⅡ处理CAL-27细胞为H-、M-、L-PⅡ组,10μg/ml PⅡ+1μmol/L RU. 521处理为RU. 521组,10μg/ml PⅡ+25 nmol/L RocA处理为RocA组,分析细胞增殖和克隆。Transwell实验检测侵袭和迁移,流式细胞仪检测凋亡。与各组自然杀伤(NK)细胞共培养检测NK细胞杀伤活性,与T细胞共培养检测CD4~+T、CD8~+T水平,Western印迹检测cGAS、STING、程序性死亡配体(PD-L) 1、基质金属蛋白酶(MMP) 9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果 相比于CAL-27组,H-、M-和L-PⅡ组CAL-27细胞凋亡率、NK细胞杀伤活性、CD4~+T和CD4~+T/CD8~+T水平显著上升,细胞存活率、克隆细胞数、细胞迁移数和侵袭数显著下降(P<0.05)。相比于H-PⅡ组,RU. 521组CAL-27细胞存活率、克隆细胞数、细胞迁移数和侵袭数显著上升,CAL-27细胞凋亡率、NK细胞杀伤活性、CD4~+T和CD4~+T/CD8~+T水平显著下降(P<0.05); RocA组细胞存活率、克隆细胞数、迁移数和侵袭数显著下降,细胞凋亡率、NK细胞杀伤活性、CD4~+T和CD4~+T/CD8~+T水平显著上升(P<0.05)。相比于CAL-27组,H-、M-和L-PⅡ组cGAS、STING蛋白表达显著上升,PD-L1、MMP9、PCNA蛋白表达显著下降(P<0.05)。相比于H-PⅡ组,RU. 521组cGAS、STING蛋白表达显著下降,PDL1、MMP9、PCNA蛋白表达显著上升(P<0.05); RocA组cGAS、STING蛋白表达显著上升,PD-L1、MMP9、PCNA蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论 PⅡ可能通过激活cGAS-STING通路,参与TSCC细胞增殖、凋亡和免疫逃逸。
关键词:胡黄连苷Ⅱ;;环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子轴;;舌鳞状细胞癌;;免疫逃逸;;凋亡