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作者：孙露瑶;王代波;余倩;田云才;曹小玉;熊亮;周勤梅;彭成;
单位：成都中医药大学;上海致臻志臣科技有限公司;
摘要：目的 研究川芎总生物碱与益母草总生物碱的最佳配伍比例，并阐明川芎总生物碱与益母草总生物碱配伍改善实验性黄褐斑模型的作用。方法 体外实验观察川芎总生物碱与益母草总生物碱不同配伍比例(5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖的影响，同时结合Chou-Talalay技术计算联合指数(CI)并筛选最佳配伍比例，并探讨最佳配伍比例对B16细胞酪氨酸酶活性和黑色素水平的影响。体内实验采用黄体酮注射联合中波紫外线照射的方法对C57BL/6小鼠耳廓进行造模，检测小鼠耳廓组织SOD活性和MDA水平，Masson-Fontana染色观察耳廓组织黑色素分布情况，Western blot法检测耳廓组织CREB、p-CREB、TRP1、TRP2、MITF、TYR蛋白表达。结果 在体外实验中，川芎总生物碱与益母草总生物碱配伍可以有效抑制B16细胞增殖，其中川芎总生物碱-益母草总生物碱比例为1∶2时IC_(50)和CI值最低，具有最优协同效应，为最佳配伍比例。与对照组比较，川芎总生物碱-益母草总生物碱1∶2配伍可有效抑制B16细胞酪氨酸酶活性和黑色素水平(P<0.05,P<0.01)。在体内实验中，与正常组比较，模型组小鼠耳廓组织中黑色素分布增多(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01),耳廓组织p-CREB、TRP1、TRP2、MITF、TYR蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较，川芎总生物碱-益母草总生物碱1∶2配伍可减少小鼠耳廓组织中黑色素分布(P<0.01),升高SOD活性(P<0.01),降低MDA水平(P<0.05),降低耳廓组织p-CREB、TRP1、TRP2、MITF、TYR蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 川芎总生物碱与益母草总生物碱配伍可以抑制B16细胞增殖，有效改善小鼠黄褐斑，其机制可能与调控CREB/MITF信号通路抑制黑色素生成有关。
关键词：川芎;;益母草;;配伍;;黄褐斑;;黑色素瘤细胞;;CREB/MITF信号通路
基金资助：国家自然科学基金面上项目(82374152);; 国家自然科学基金区域创新发展联合基金重点项目(U24A20790);; 国家中医药多学科交叉创新团队项目(ZYYCXTD-D-202209);; 四川省中医药科技产业创新团队(2022C001)
