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作者:任毅帆;赵晨宇;薛傲;孙惠;姜珊;王瑶瑷;李光;张宁;
单位:黑龙江中医药大学;南京中医药大学附属无锡医院;中国医学科学院药用植物研究所云南分所;
摘要:目的 探究肾茶及其入血成分对高尿酸血症(HUA)的改善作用。方法 40只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、非布司他组(6 mg/kg)和肾茶组(2 g/kg),每组10只,除空白组外,其余各组采用腺嘌呤联合氧嗪酸钾诱导HUA小鼠模型,连续21 d,造模期间给予相应剂量药物,HE、Masson染色观察肾组织病理形态,全自动生化仪检测血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,ELISA法检测肾组织TNF-α水平及Caspase-1、SOD活性,IHC法检测肾组织IL-18、IL-1β、NLRP3炎性小体的阳性面积。采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定肾茶入血活性成分,基于网络药理学预测作用靶点,并借助Autodock软件进行分子对接,预测结合能力,最后采用Western blot法对预测结果进行验证。结果 与模型组比较,肾茶组小鼠肾功能损伤改善,血清UA、Cr、BUN水平降低(P<0.01),肾组织SOD活性升高(P<0.01),Caspase-1活性及TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体阳性面积减少(P<0.01)。共鉴定出12种肾茶入血活性成分,网络药理学筛选得到TNF、ABCG2等15个核心靶点。分子对接证实,核心成分与靶点结合能均<-4.0 kcal/mol。Western blot实验证实,肾茶组小鼠肾组织TNF、PTGS2、TLR4、RELA蛋白表达降低(P<0.01),CCL2、ABCG2蛋白表达升高(P<0.01)。结论 本研究证实肾茶可改善HUA,并筛选得到其入血有效成分,初步预测这些成分通过TNF、PTGS2、TLR4、CCL2、RELA、ABCG2等靶点减轻炎症反应,从而发挥作用。
关键词:肾茶;;高尿酸血症;;UPLC-Q-TOF-MS/MS;;入血成分;;分子对接;;网络药理学
基金资助:科技人才与平台计划(院士专家工作站)(202405AF140073)