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作者:韩甜甜;刘孝靖;赖艳妮;李丹华;
单位:广州医科大学附属中医医院;广州医科大学中西医临床学院;顺德职业技术学院;广州中医药大学第一附属医院;
摘要:目的 通过体内外实验探讨血必净注射液的抗病毒作用。方法 体外构建流感病毒感染MDCK细胞模型,设置正常组、病毒组和血必净注射液1.562 5、3.125、6.25、12.5、25、50 mg/mL组,同时设奥司他韦组为阳性对照;采用CCK-8法检测细胞存活率以评估药物细胞毒性及细胞病变抑制效果,噬斑减少实验检测病毒噬斑形成情况,RT-qPCR法和Western blot法检测病毒核蛋白(NP)mRNA和蛋白表达,对比预防性、同时性、治疗性3种给药方式(均干预48 h)的抗病毒效果。体内建立BALB/c小鼠感染模型,将60只小鼠随机分为正常组(生理盐水滴鼻)、模型组[滴鼻感染2×半数致死量(LD_(50))H1N1病毒]、奥司他韦组(每天5×10~(-3) mg/g灌胃)和血必净注射液低、高剂量组(每天5、10 mg/g尾静脉注射),每组12只,感染后2 h开始给药,每天1次,连续6 d;采用生存实验记录14 d内小鼠存活情况,检测肺指数、湿/干重比并进行肺组织病理评分,流式细胞术检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,噬斑法检测肺组织病毒滴度,Western blot法检测肺组织NP蛋白表达。结果 体外实验显示,血必净注射液(1.562 5~50 mg/mL)可抑制MDCK细胞病变,减少噬斑形成,降低NP mRNA和蛋白表达(P<0.01),且治疗性给药模式效果最优。体内实验显示,血必净注射液可提高感染小鼠存活率(高剂量组40%),改善肺指数、湿/干重比及病理损伤(P<0.05,P<0.01),降低炎症因子IL-6、TNF-α水平和肺组织NP蛋白表达(P<0.01)。结论 血必净注射液对甲型流感病毒具有明确抗病毒作用,其机制可能是抑制病毒蛋白表达,进而减轻肺部炎症损伤。
关键词:血必净注射液;;甲型流感病毒;;抗病毒;;肺损伤;;炎症因子;;核蛋白(NP)
基金资助:广州市科学技术局市校院(企)联合项目(2025A03J3342);; 教务处-广医大一流专业建设项目-2025年大学生创新训练项目(02-408-2501-2398);; 广州中医药大学第一附属医院-国家中医药传承创新中心科研专项(2022QN15)