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吉林大学学报(医学版)2024年第02期:抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测

来源:期刊VIP网 时间:


作者:苏海涛;翟玥;宋秀玲;徐坤;

单位:吉林省疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所;吉林大学公共卫生学院卫生检验教研室;湖南师范大学医学院食品与营养卫生教研室;

摘要:目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000 (PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.015 60、 0.031 25、 0.062 50、 0.125 00、 0.500 00、和1.000 00 g·L~(-1))作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力。结果:制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1 024 000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L~(-1);IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.500 00 g·L~(-1)及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变。结论:成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发。

关键词:单纯疱疹病毒1型;;卵黄抗体;;中和病毒;;体外抗病毒能力

基金资助:吉林省科技厅科技创新基地(平台)建设项目(YDZJ202302CXJD054)