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作者：那佈其;权春姬;赵芳;杨凡;肖茹;金雪梅;李珍玲;
单位：延边大学附属医院病理科;健康产业集团铁煤总医院病理科;
摘要：目的：探讨泛素化组蛋白（H2AX）在前列腺癌（PCa）和癌旁良性前列腺组织中的表达及与其PCa患者临床病理参数之间的关系，阐明新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi） CUDC-101对PCa的DNA损伤、迁移及上皮-间质转化（EMT）的影响。方法：肿瘤基因组谱（TCGA）数据库和UALCAN数据库检索各种癌症组织中H2AX mRNA的表达情况及其在PCa与正常前列腺组织中的表达差异，分析其表达与PCa患者临床预后的关系；采用免疫组织化学染色法检测在PCa组织和癌旁良性前列腺组织中H2AX蛋白的表达情况，分析H2AX蛋白表达与PCa患者临床病理参数的关系；体外培养DU145细胞，分为对照组、5%FBS组、5%FBS+100μmol·L~(-1) CUDC-101组和5%FBS+200μmol·L~(-1) CUDC-101组，采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测CUDC-101处理前后PCa DU145细胞的细胞划痕面积及迁移细胞数；免疫荧光染色法检测CUDC-101处理后PCa DU145细胞中上皮细胞标志物E钙黏蛋白（E-cadherin）和磷酸化组蛋白γ-H2AX表达情况；Western blotting法检测CUDC-101处理后EMT相关蛋白、γ-H2AX和磷酸化蛋白激酶B (p-AKT)表达情况。结果：TCGA数据库和UALCAN数据库分析，H2AX mRNA在PCa组织中高表达，并且H2AX低表达组患者的无病生存期（DFS）明显高于H2AX mRNA高表达组（P<0.001）；免疫组织化学染色，在PCa组织中H2AX蛋白强阳性表达率高于在癌旁良性前列腺组织（64.34%vs 14.29%），其过表达与PCa的T分期（P=0.001）和世界卫生组织/国际泌尿科病理学会（WHO/ISUP）预后分级分组（P=0.004）有关，但与PCa患者的年龄、Gleason评分、淋巴结转移、神经和脉管浸润无关（P>0.05）；免疫荧光染色法检测，与对照组和EMT诱导组比较，CUDC-101处理组E-cadherin和γ-H2AX蛋白的荧光表达增强；细胞划痕实验和Transwell小室实验检测，与对照组比较，CUDC-101处理组DU145细胞愈合面积和迁移细胞数明显下调；Western blotting法检测，与EMT诱导组比较，CUDC-101处理组E-cadherin和γ-H2AX蛋白表达水平升高P<0.05或P<0.01），波形蛋白（Vimentin）和p-AKT蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：H2AX蛋白过表达与PCa患者的不良预后密切关联。新型HDACi抑制剂CUDC-101可调控H2AX和AKT的磷酸化，抑制PCa细胞EMT过程。
关键词：CUDC-101;;泛素化组蛋白;;前列腺肿瘤;;上皮-间质转化;;DNA损伤
基金资助：国家自然科学基金地区基金项目（81860043）;国家自然科学基金青年基金项目（81902790）;; 吉林省科技厅科技发展计划项目（20200201571JC）;; 延边大学应用基础项目（延大科合字[2019]第27号）
