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作者：刘玥欣;来永巍;王艳春;徐博;路倩;安英;任旷;范红艳;
单位：吉林医药学院药学院药理学教研室;吉林医药学院基础医学院机能实验室;
摘要：目的：观察苦参总黄酮（SF）对醋酸铅（LA）诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1 (Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2 (Nrf2)信号通路的影响，探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法：利用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度（0、10、20、50和80μmol·L~(-1)） LA和不同浓度（0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L~(-1)） SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率；将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外，其他各组均采用50μmol·L~(-1) LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型，其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L~(-1) SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率；WST-1法和硫代巴比妥酸（TBA）法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平；Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9 (Caspase-9)蛋白表达水平。结果：MTT法检测，与0μmol·L~(-1) LA组比较，10、20、50和80μmol·L~(-1) LA组TM3细胞存活率明显降低（P<0.01）；与0 mg·L~(-1) SF组比较，12.5、 25.0、50.0和80.0 mg·L~(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低（P<0.05或P<0.01）；与LA组比较，LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高（P<0.01）; WST-1法和TBA法检测，与LA组比较，LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高（P<0.01）,MDA水平明显降低（P<0.01）;Western blotting法检测，与LA组比较，LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。结论：SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用，并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平，升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。
关键词：苦参总黄酮;;醋酸铅;;睾丸间质细胞;;氧化应激;;KELCH状ECH相关蛋白1;;核因子E2相关因子2
基金资助：吉林省教育厅科学技术研究项目（JJKH20210498KJ）
