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作者:范丽霞;廖小红;黄育生;冯时茵;张庆业;
单位:广州中医药大学第一附属医院;广东省中医临床研究院;广州中医药大学第一临床医学院;广州中医药大学岭南医学研究中心;
摘要:目的 探讨仙鹤草提取物对肺癌A549细胞的抑制作用以及通过铁死亡抑制肺癌细胞的作用机制。方法 制备仙鹤草提取物(XHC),将细胞分为对照组(XHC 0 mg/mL), XHC 5 mg/mL组,XHC 10 mg/mL组,XHC 20 mg/mL组。通过CCK-8法检测细胞增殖情况,克隆实验检测细胞克隆形成能力,比色法检测4组细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,RT-qPCR检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)、环氧合酶-2(COX2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链(FTH1)、SLCA11 mRNA水平,Western Blot检测铁死亡相关蛋白,荧光观察细胞亚铁离子含量。结果 与对照组相比,不同浓度XHC对A549细胞的增殖能力具有抑制作用,且这种抑制作用呈现浓度依赖性;克隆实验结果显示,与对照组比较,XHC处理后的A549细胞克隆形成的细胞团块数量及大小均减少,克隆形成率降低(P<0.05)。经XHC处理后的A549细胞与对照组比较,SOD、GSH含量显著降低,MDA含量显著升高(P<0.05);NOX1、COX2 mRNA、蛋白表达水平在XHC处理后的组别中显著升高,GPX4、FTH1、SLCA11 mRNA、蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与对照组比较,XHC各剂量组细胞Fe~(2+)荧光强度显著增强(P<0.05)。结论 仙鹤草提取物对肺癌A549细胞具有抑制增殖及克隆形成的作用,且抑制作用呈浓度依赖性,同时仙鹤草提取物的抑制作用机制可能与铁死亡相关。
关键词:仙鹤草;铁死亡;A549
基金资助:国家自然科学基金项目(81804048); 广东省中医药局科研项目(20231166,20141077)