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作者：江静;张小卿;曹锐;陈怡然;周歆;胡楠;孙世婧;李佳欣;石蓉;
单位：辽宁中医药大学针灸推拿学院;辽宁省教育厅针灸生物学重点实验室;辽宁中医药大学附属医院;
摘要：目的 观察电针干预脑缺血再灌注损伤大鼠对其海马区星形胶质细胞活化的作用机制，及对活性氧(reactive oxygen species, ROS)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein, TXNIP)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3[nucleotidebinding oligomerization domain(NOD)-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3]表达的影响。方法 48只成年雄性SD大鼠随机分为4组，假手术组、模型组、ROS抑制剂组与电针组，每组12只。通过Koizumi线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型，采用Longa评分法对大鼠进行纳入与剔除，假手术组仅剥离颈动脉。抑制剂组需造模前3 d开始用ROS抑制剂n-乙酰-1-半胱氨酸溶液进行灌胃，共连续灌胃10 d,电针组选取百会、印堂以及双侧足三里进行干预，10 min/d,共7 d。圆筒实验观察神经功能恢复情况，2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法检测脑梗死面积，免疫组化法检测海马区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的阳性表达，二氢乙啶(dihydroethidium, DHE)荧光探针检测海马区ROS含量，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区GFAP、TXNIP、NLRP3蛋白表达，免疫荧光法测定海马区TXNIP与NLRP3共定位情况。结果 与假手术组比较，模型组不对称指数明显降低，神经功能损伤程度较重(P<0.01),脑梗死面积范围较大(P<0.01),GFAP阳性表达以及蛋白含量增多(P<0.01),星形胶质细胞增殖较少，胞体纤维突起程度较弱，ROS、TXNIP与NLRP3含量显著上升(P<0.01);与模型组比较，ROS抑制剂组与电针组不对称指数较高，神经功能损伤恢复情况良好(P<0.05,P<0.01),脑梗死面积范围缩小(P<0.01),GFAP阳性表达以及蛋白含量增多显著(P<0.01),星形胶质细胞增殖活化程度增多，排列紧密，细胞纤维突起程度增加，ROS、TXNIP与NLRP3含量均有下降(P<0.05,P<0.01),且电针组较抑制剂组更为显著。结论 电针干预可以恢复大鼠的神经功能损伤，其机制可能与促进星形胶质细胞增殖活化，抑制ROS-TXNIP-NLRP3信号通路有关，以减轻氧化应激及炎性反应，发挥脑保护作用。
关键词：电针;脑缺血再灌注;星形胶质细胞;ROS-TXNIP-NLRP3信号通路
基金资助：国家自然科学基金青年科学基金项目(82305391); 辽宁省科技厅应用基础研究计划项目(2023JH2/101300052); 辽宁省科技厅联合基金项目(2023-MSLH-197); 辽宁省教育厅基本科研项目(面上项目)(JYTMS20231820);辽宁省教育厅基本科研项目(青年项目)(LJKQZ2021066);辽宁省教育厅高校基本科研项目(LJ232410162029); 辽宁中医药大学自然科学项目(重点项目)(2021LZY050)
