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作者：闵晓黎;石颖;李艺;郭利华;刘颖;王亮开;李东鸽;刘建丽;杨小霞;张双双;吴盛;
单位：云南中医药大学第一附属医院;昆明医科大学第二附属医院;云南中医药大学;
摘要：目的 探讨银甲丸调节自噬和内质网应激对宫颈癌细胞HeLa的凋亡作用。方法 CCK-8法筛选银甲丸干预质量浓度，将HeLa细胞分为空白组、溶剂组(0.1%DMSO)、银甲丸组(10 mg/mL)。CCK-8法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡率；克隆实验测定集落形成；Transwell检测细胞侵袭能力；划痕实验检测细胞迁移程度；Western blot法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、LC3Ⅱ/I、p62、Beclin-1、CHOP、ATF4、XBP-1、GRP78蛋白表达；免疫荧光法检测LC3B、CHOP蛋白表达。同时验证PI3K信号通路抑制剂LY294002、自噬抑制剂CQ、内质网应激抑制剂4-PBA对银甲丸的逆转作用。结果 银甲丸可以抑制HeLa细胞增殖活力，10 mg/mL时效果接近IC_(50)值(P<0.01)。与对照组比较，银甲丸组HeLa细胞凋亡率升高(P<0.01),侵袭能力和迁移能力减弱(P<0.01),p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、CHOP、ATF4、XBP-1、GRP78、LC3Ⅱ/I、Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01),p62蛋白表达降低(P<0.01),LC3B、CHOP蛋白荧光表达增强(P<0.01)。使用PLY294002处理细胞后可以有效逆转银甲丸的作用。结论 银甲丸可通过PI3K/Akt/mTOR信号通路促进细胞自噬和内质网应激，进而促进宫颈癌细胞HeLa的凋亡。
关键词：银甲丸;;宫颈癌;;内质网应激;;自噬;;细胞凋亡;;HeLa细胞;;PI3K/Akt/mTOR信号通路
基金资助：云南省科技厅-云南中医药大学应用基础研究联合专项面上项目[2018FF001(-055)];; 云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项面上项目(202301AY070001-271);; 云南省应用基础研究-中医联合专项项目[2018FF001(-013)];; 云南省专业学位研究生教学案例库建设项目(2023);; 云南省第一批中医临床优秀人才研修项目(2023)
