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作者:侯渌茗;李莹;许嘉鸿;李正鑫;马函琳;陈逸云;
单位:上海中医药大学附属龙华医院感染科;上海市浦东新区公利医院中医科;
摘要:目的 探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响。方法 通过棕榈酸+油酸(PO, 0.5+0.25mmol/L)或棕榈酸(PA, 0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型。将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、 40、 80μmol/L组。CCK8法测定细胞活力;生化试剂盒检测细胞甘油三酯(TG)水平;尼罗红染色检测细胞脂滴沉积情况;RT-qPCR法检测细胞内相关脂质代谢基因SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1,炎症基因IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL10及AMPK/ACC/CPT1A通路相关基因AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达;Western blot法检测细胞p-AMPKα、 AMPKα、 p-ACC、 ACC、 CPT1A蛋白表达。结果 0~100μmol/L Pur对AML-12细胞活力无明显抑制作用(P>0.05)。与对照组比较,模型组AML-12细胞尼罗红染色半定量和TG水平升高(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL10 mRNA表达升高(P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1AmRNA表达降低(P<0.01); p-AMPK/AMPK、 p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,Pur 40、 80μmol/L组细胞尼罗红染色半定量和TG水平降低(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL10 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1AmRNA表达升高(P<0.05,P<0.01); p-AMPK/AMPK、 pACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 Pur对AML-12细胞脂质沉积有较好的抑制作用,其作用可能与调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路相关。
关键词:羟基茜草素;;AML-12细胞;;棕榈酸;;油酸;;脂质沉积;;脂代谢;;炎症;;AMPK/ACC/CPT1A信号通路
基金资助:上海市浦东新区卫生系统学科带头人(PWRd2024-15);; 上海市中医药高层次人才引领计划(沪卫中发[2021] 2号);; 上海市浦东新区卫生健康委员会面上项目(PW2021A-45)