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作者：田苗;贾连群;宋囡;闵冬雨;王洋;关乐;鞠业涛;王凤荣;
单位：辽宁中医药大学附属医院;辽宁中医药大学;
摘要：目的 研究通过体外实验观察健脾化痰方对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞活力、增殖、表型转换及炎症因子的影响。方法 C57BL/6J小鼠分离胸主动脉制备平滑肌细胞。6～8周龄SD(Sprague Dawley)大鼠灌胃给药，腹主动脉取血制备含药血清。DMEM培养基培养，ox-LDL:100μg/m L ox-LDL诱导，Atorvastatin:ox-LDL+阿托伐他汀(0.4μM)含药血清，JPHTF-L/M/H:ox-LDL+JPHTF含药血清(5%,10%,15%)。免疫荧光染色α-SMA抗体鉴定初代VSMCs。CCK-8法检测细胞活力，Transwell实验观察细胞迁移情况，Western Blot检测细胞中α-SMA、Calponin、SM22α、PCNA、OPN、ASC、NLRP3、cleaved Caspase-1表达，ELISA检测细胞上清中IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6的含量。结果 JPHTF抑制ox-LDL诱导的VSMCs增殖和表型转换，JPHTF处理可降低NLRP3、ASC和cleaved Caspase-1蛋白表达水平，ELISA结果提示JPHTF处理能显著降低IL-1β和IL-18含量，降低TNF-α和IL-6炎症因子的水平。结论 健脾化痰方体外作用可抑制ox-LDL诱导的VSMCs从收缩表型向合成表型转换，降低细胞增殖和细胞迁移能力，减少NLRP3、ASC和cleaved Caspase-1水平，抑制炎症小体的激活，从而延缓动脉粥样硬化发展。
关键词：健脾化痰方;;动脉粥样硬化;;血管平滑肌细胞;;表型转化;;NLRP3
基金资助：国家自然科学基金青年科学基金项目(81904079);; 辽宁省科技计划联合计划技术攻关项目(2024JH2/102600194);; 沈阳市科技局常见多发病医疗技术提升项目(21-173-9-53)
