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作者：陈晓霞;杨辉;邹贤群;余静;刘永杰;
单位：吉林农业科技学院动物科技学院;吉林省万邦鹅业技术服务有限公司;
摘要：试验旨在探究γ-氨基丁酸A型受体亚基α1 (GABRA1)基因对蛋鸡等级前卵泡颗粒细胞分子的调控作用。采用靶向特异性短发夹RNA (shRNA)干扰技术，构建干扰表达载体。试验分为3组，分别是空白组（BC组）、阴性对照组（NC组）和shRNA GABRA1干扰组（shRNA GABRA1组），分别转染到蛋鸡等级前卵泡颗粒细胞（4～8 mm），转染48 h后，利用实时荧光定量RT-qPCR、Western Blot技术，探讨其对鸡卵泡颗粒细胞增殖基因细胞周期蛋白D1 (CCND1)、细胞分化、类固醇合成基因类固醇合成快速调节蛋白（StAR）和细胞色素P450家族11亚家族A成员1 (CYP11A1)、细胞凋亡基因半胱天冬酶-3 (Caspase-3)和B-细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)的mRNA和蛋白表达水平的影响，采用EDU试剂盒和流式细胞术检测颗粒细胞增殖和凋亡状况。结果显示，与BC组和NC组相比，shRNA GABRA1组的CCND1、StAR、CYP11A1和Bcl-2基因的m RNA和蛋白质表达极显著升高（P<0.01）,Caspase-3基因的mRNA和蛋白质表达极显著降低（P<0.01）；颗粒细胞的增殖指数显著升高（P<0.05），总凋亡率显著下降（P<0.05）。研究表明，GABRA1能够抑制鸡早期卵泡颗粒细胞的增殖和分化，促进凋亡，进而影响卵泡的生长和发育。
关键词：shRNA干扰;;GABRA1;;颗粒细胞;;增殖;;凋亡
基金资助：吉林省科技发展计划项目（项目编号：YDZJ202201ZYTS609）
