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作者：满建呈;成娟;赵丽;
单位：兰州大学第一临床医学院,兰州大学第一医院中心实验室,甘肃省血液病遗传研究重点实验室;
摘要：目的：通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建稳定敲除HOXA5基因的急性髓系白血病（AML）细胞株，明确HOXA5基因敲除对AML细胞增殖的影响，初步探索HOXA5基因在AML发病中的作用。方法：通过荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot技术分别检测血液系统非肿瘤患者与初诊AML患者骨髓单个核细胞（BMMC）中HOXA5的表达；应用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建稳定敲除HOXA5基因的AML细胞株KO-HOXA5-THP-1，通过q RT-PCR和Western blot检测KO-HOXA5-THP-1细胞中HOXA5的表达，并采用CCK-8实验检测细胞增殖情况。结果：与血液系统非肿瘤患者相比，初诊AML患者骨髓单个核细胞中HOXA5基因及蛋白水平均显著升高(P<0.05)。应用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够获得稳定敲除HOXA5基因的细胞株，而且敲除HOXA5基因后的THP-1细胞株的增殖能力显著下降(P<0.05)。结论：HOXA5在AML细胞中高表达，敲除HOXA5能够显著影响AML细胞的增殖能力，这为急性髓系白血病的精准治疗提供了一个新的潜在治疗靶点。
关键词：急性髓系白血病;;HOXA5基因;;CRISPR-Cas9
基金资助：甘肃省自然科学基金（21JR1RA114）;; 兰州大学第一医院院内基金学科交叉研究基金（ldyyyn2020-89）
