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作者：孙启鑫;吴秉毅;姚倩倩;黄志伟;朱志刚;
单位：广州市第一人民医院(华南理工大学第二附属医院)老年血液肿瘤科;中山大学肿瘤研究中心血液肿瘤科;南方医科大学珠江医院血液科;
摘要：目的:构建可调控c-Cbl基因表达的重组慢病毒与腺病毒并评估其功效。方法:应用基因重组技术，分别构建靶向人c-Cbl基因的干扰慢病毒和过表达腺病毒。采用定量PCR和免疫印迹法检测病毒感染后白血病细胞(HL60、THP1)c-Cbl基因表达与转录本的变化。结果:3个靶向人c-Cbl基因的重组干扰慢病毒载体经测序验证构建成功，包装的病毒滴度均大于1×10~8 TU/ml,其中shRNA-2号慢病毒干扰效率最高，白血病细胞感染后c-Cbl基因的表达约下调95%,CBL蛋白的表达约下调60%;同时，靶向人c-Cbl基因的重组过表达腺病毒载体也经测序验证构建成功，包装的病毒滴度大于1×10~9 TU/ml,细胞感染腺病毒后，c-Cbl基因表达可瞬时上调约10倍，CBL蛋白表达约上调1.5倍。结论:重组干扰慢病毒和过表达腺病毒均可高效感染白血病细胞，并能分别下调和上调c-Cbl基因与CBL蛋白的表达，为后续研究肿瘤细胞内c-Cbl基因功能打下前期基础。
关键词：c-Cbl基因;;慢病毒载体;;腺病毒载体
基金资助：广东省医学科研基金(A2019508);; 广东省高水平大学建设项目(LC2016ZD026);; 广州市医学重点学科项目(ZDXK202103)
