来源：期刊VIP网 时间：
作者：张燕群;孟昭昀;王秀玲;李静;张雷;
单位：山东第一医科大学附属人民医院保健科;山东第一医科大学附属人民医院全科医学科;济南市莱芜人民医院心电图室;
摘要：目的 探讨环状RNA同源域相互作用蛋白激酶(CircHIPK)3调节微小RNA(miR)-495-3p/细胞周期蛋白(CCN)D1轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法 利用H/R诱导心肌细胞H9C2损伤，记为H/R组；分别将CircHIPK3小干扰RNA(si-CircHIPK3)、siRNA阴性对照(siRNA-NC)及si-CircHIPK3分别与抑制剂对照(inhibitor-NC)、miR-495-3p抑制剂(miR-495-3p-inhibitor)转染或共转染H9C2细胞并进行H/R诱导损伤，标记为H/R+si-CircHIPK3组、H/R+siRNA-NC组、H/R+si-CircHIPK3+inhibitor-NC组、H/R+si-CircHIPK3+miR-495-3p-inhibitor组，同时以未经处理的H9C2细胞为空白组。双荧光素酶验证miR-495-3p与CircHIPK3、CCND1关系；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-495-3p、CircHIPK3、CCND1表达水平；流式细胞仪及CCK-8检测细胞凋亡与增殖；试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平；Western印迹检测凋亡蛋白活化(Cleaved)胱天蛋白酶(caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、CCND1及增殖蛋白Ki67表达。结果 miR-495-3p分别与CircHIPK3、CCND1存在靶向关系。与空白组相比，H/R组H9C2细胞SOD水平、增殖率、Ki67、miR-495-3p表达显著降低，LDH、MDA水平、CircHIPK3、Bax、Cleaved caspase-3蛋白、CCND1蛋白及mRNA表达、凋亡率显著增加(P<0.05);与H/R+siRNA-NC组相比，H/R+si-CircHIPK3组H9C2细胞SOD水平、增殖率、Ki67、miR-495-3p表达显著增加，LDH、MDA水平、CircHIPK3、Bax、Cleaved caspase-3蛋白、CCND1蛋白及mRNA表达、凋亡率显著降低(P<0.05);与H/R+si-CircHIPK3+inhibitor-NC组相比，H/R+si-CircHIPK3+miR-495-3p-inhibitor组H9C2细胞SOD水平、增殖率、Ki67、miR-495-3p表达显著降低，LDH、MDA水平、Bax、Cleaved caspase-3蛋白、CCND1蛋白及mRNA表达、凋亡率显著增加(P<0.05)。结论 沉默CircHIPK3通过调控miR-495-3p/CCND1轴减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。
关键词：缺氧/复氧;;环状RNA(CircRNA)HIPK3;;微小RNA(miR)-495-3p/细胞周期蛋白(CCN)D1;;心肌细胞损伤
基金资助：国家自然科学青年基金项目(81900332);; 山东省医药卫生科技发展计划项目(2021BJ000019)
